医学论文：高效液相色谱法测定骨疏灵提取物中淫羊藿苷含量.docVIP

?????????????? 作者：王淑梅,高振强,王川平,孙倩,刘倩,李宏辉 【摘要】? 目的 测定骨疏灵提取物中淫羊藿苷的含量。方法 采用高效液相色谱法,色谱柱为luna c18(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-水(3070),检测波长270 nm。结果 淫羊藿苷的线性范围为0.416～2.496 μg,回归方程为y=2.0×106x-53 810(r=0.999 9)。结论 所用高效液相色谱法简便、快速、准确,可用于测定骨疏灵微球提取物中淫羊藿苷的含量。 【关键词】? 高效液相色谱法；骨疏灵；淫羊藿苷；含量测定 ??? abstract：objective to determine the content icariin in the extract of gushuling. methods hplc method was performed on luna c18 column (250 mm×4.6 mm, 5 μm). the mobile phase consisted of acetonitrile- water (30∶70) and the uv detective wavelength was set at 270 nm. results the curve of icariin was linear within 0.416～2.496 μg, y=2.0×106x-53 810 (r=0.999 9). conclusion hplc method is simple, rapid and accurate, and it is suitable for ananlysis of icariin content in extract of gushuling .??? 　　key words：hplc；extract；icariin；determination???? 骨疏灵是由淫羊藿、骨碎补、黄芪、葛根4味药材组成,经提取加工制成微球制剂。该制剂具有补益肝肾、强筋壮骨的功效,主要用于治疗肾虚气血不足所致的原发性骨质疏松等症。淫羊藿为方中主药,其主要活性成分为淫羊藿苷。为了有效控制该制剂的内在质量,本实验采用高效液相色谱法1,对其提取物中主要功效成分淫羊藿苷进行了含量测定。所用方法简便、快速、准确,为该制剂质量控制提供了更加准确、可行的方法。　　1? 仪器与材料 ??? waters 486高效液相色谱仪(美国)；fa/ja电子天平(上海精天电子仪器公司)；sb2200-t超声波清洗器(上海必能信超声有限公司)。淫羊藿苷对照品(中国药品生物制品检定所提供,供含量测定,批号110737-200312)；骨疏灵提取物(浸膏粉,自制)。乙腈为色谱纯；甲醇为分析纯；水为重蒸水。　　2? 方法结果　　2.1? 色谱分析条件 ??? 色谱柱：luna c18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)；流动相：乙腈-水(30∶70)；检测波长：270 nm；流速：1.0 ml/min；柱温：室温；进样量：20 μl。在上述色谱条件下,淫羊藿苷(出峰时间为6.43 min)与其它组分可达到基线分离,阴性样品无干扰。见图1。　　2.2? 对照品溶液的制备 ??? 精密称取淫羊藿苷对照品5.2 mg,置25 ml容量瓶中,加少量甲醇溶解并定溶至刻度,摇匀,即得贮备液(208.0 μg/ml)。分别精密吸取此储备液1、2、3、4、5、6 ml,加甲醇定溶至10 ml容量瓶中,摇匀,配制成浓度分别为20.8、41.6、62.4、83.2、104.0、124.8 μg/ml的系列溶液。　　2.3? 供试品溶液的制备 ??? 取供试品适量,研细,精密称取细粉1.0 g,用甲醇溶解,超声处理10 min,过滤,滤液用甲醇定溶于100 ml容量瓶中,取其中5 ml,用甲醇定容于100 ml容量瓶中。用微孔滤膜(0.45 μm)滤过,取续滤液作为供试品溶液。　　2.4? 阴性对照品溶液的制备 ??? 按处方组成,提取制备不含淫羊藿苷的阴性样品,按上述供试品溶液的制备方法制备阴性对照品溶液。　　2.5? 标准曲线和线性关系的考察 ??? 取上述各对照品溶液20 μl依次进样,记录色谱图,以峰面积值为纵坐标,进样量为横坐标,绘制标准曲线,结果淫羊藿苷进样量在0.416～2.496 μg之间与峰面积线性关系良好,回归方程为：y=2.0×106x-53 810(r=0.999 9)。　　2.6? 精密度试验 ??? 精密吸取同一对照品溶液(62.4 μg/ml)20 μl,重复进样6次,测定淫羊藿苷的峰面积值,rsd=1.5%,表明本法精密度良好。　　2.7? 重现性试验 ??? 取同批样品6份,按供试品溶液的