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第十三单元 重组DNA技术 第一节 重组DNA技术概述 一、重组DNA技术相关的概念 (一)克隆与克隆化 所谓克隆就是指来自同一母本的所有副本或拷贝的集合；获取同一拷贝的过程称为克隆化，又称无性繁殖。克隆可以是细胞的，也可以是分子的。分子克隆专指DNA克隆。 (二)基因工程 亦称遗传工程，就是应用酶学的方法，在体外将各种来源的遗传物质——同源的或异源的、原核的或真核的、天然的或人工合成的DNA与载体DNA结合成一复制子，继而通过转化或转染等导入宿主细胞(安全宿主菌)，生长、筛选出含有目的基因的转化子细胞。转化子细胞经扩增、提取获得大量目的DNA的无性繁殖系，即DNA克隆，又称基因克隆。“克隆”过程中，将外源DNA(感兴趣的DNA)插入载体分子所形成的复制子是杂合分子——嵌合DNA，所以DNA克隆、或基因克隆又称重组DNA。涉及上述操作过程的各项技术统称重组DNA技术或基因工程。 (三)工具酶 在基因工程技术中需要一些基本工具酶进行操作。例如，对基因或DNA进行处理时需利用序列特异的限制性核酸内切酶在准确的位置切割DNA，使较大的基因片段或DNA分子成为较小的DNA片段；有时需在DNA连接酶催化下使较小的DNA片段连接成较大的DNA分子。此外，DNA聚合酶、反转录酶、多聚核苷酸激酶和末端转移酶等也是基因工程技术中常用的工具酶。 限制性核酸内切