第35章 朊病毒.pptxVIP

亚病毒（subvirus ）;朊病毒（Prion）;;;;牛海绵状脑病（BSE);一、概述;1996年3月20日英国承认：人通过食用牛肉传染上类似于疯牛病的新型克-雅氏病（v-CJD)，是可能的。世人从此谈“牛”色变。 据报道，英国现在因为疯牛病每年要损失7.8亿英镑 2003年5月21日，在加拿大的阿尔塔省又发生一例疯牛病病例，引起了各国的恐慌。;二、BSE病原学;PrPc(prion protein)是一个正常的蛋白，由253-254aa组成，分子量约为33-37kDa，主要分布于神经元表面和淋巴细胞内；当PrPc转变为PrPsc 时，即具有致病性。 分子杂交实验证明，编码PrP的基因普遍存在于小鼠、大鼠、羊、人等脊椎动物体内，统称为Pro-P基因。 ; 基因调控 用基因敲除技术培育的转基因小鼠缺乏PrPc基因，在接种痒病朊病毒蛋白不发病。 将正常脑组织块移植到此种转基因小鼠的脑内，接种后仅移植的正常部位发生病变。 将小鼠的 PrPc基因敲除，以???PrPc基因取而代之，接种牛海绵状脑病朊病毒时，小鼠在500d左右发生神经性疾病，并产生病变，这一发现揭示了人的新型克雅氏病与牛海绵状脑病的关系。;PrPsc的复制增殖;6、 PrPsc的致病机理 朊病毒侵入机体后，早期在淋巴系统内，经过一定潜伏期后，集中在中枢神经系统，导致淀粉样原纤维、 痒病相关纤维和淀粉样斑的形成。;PrPc 与PrPsc 的区别：;三、疯牛病的传播途径 消化道为主要途径：主要通过食用感染或污染的牛、羊肉及制品。 英国的疯牛病认为是因在1988年之前在牛的饲料中添加羊的肉和骨等产品作为蛋白质来源而引起的。 ;四、朊病毒的检测方法 1、临床症状诊断 早期临床症状表现为行为异常，即恐惧、疯狂和不安暴躁；后肢运动失调、震颤和摔倒，姿势不稳，运动异常；感觉上表现为对声音和光的高度敏感性；还表现为痴呆、行为反常等神经症状。该病的病程发展缓慢，但全部以死亡告终，表现为渐进性中枢神经系统（CNS）疾病。 ;2、动物接种试验 常用的实验动物是小鼠、大鼠和仓鼠，利用建立动物感染模型来判断生物体是否感染朊病毒。 常规方法是将无菌的组织标本匀浆后作10倍连续稀释，将每个稀释度溶液接种于实验动物的脑内。对接种动物每3d检查1次，发现其出现毛乱、弓背、运动过慢和后肢瘫痪等病状后逐日检查，濒死扑杀，取脑组织作病理学检查，以验证朊病毒感染。如接种动物不发病，则继续观察至其死亡或适时盲传，最后取脑组织作病理学检查。根据动物发病和死亡数计算滴度。;3、组织病理学诊断 表现为神经元和胶质细胞空泡化、灰质海绵状病变，形成单独或成簇的空泡样病灶，神经胶质细胞和星形细胞增生，无炎症反应。大脑灰质病变广泛，可侵犯基底神经节、下丘脑及小脑的深层核，以病原因子PrPsc蓄积和淀粉样蛋白斑块为特征，病变通常两侧对称。病灶中的蛋白纤维可呈放射状排列，为特定的局限性分布。大脑皮质可见神经纤维节。电镜观察在淀粉样病变区可见纤维样蛋白结构成簇交叉排列，直径10～20nm，长约100～200nm。; ;预防与控制 禁用肉骨粉饲料喂牛 污染朊病毒的肉骨粉作饲料喂牛是导致BSE的病因。自2000年起，欧盟国家已全面禁止使用。 检疫淘汰焚毁病牛 并对30月龄以上的牛全面检查，发现病牛的牛群全部淘汰、焚毁。污染物品可用高压蒸气136℃处理2h，或用5.25％次氯酸钠钠浸泡。