《临床血液学检验》教案12血栓与止血检验方法.docVIP

第十二章 血栓与止血检验方法 血栓与止血的筛选检验 一、一期止血缺陷的筛选检验 包括出血时间、毛细血管抵抗力试验、血小板计数和血块收缩试验，这些试验均见《临床基础检验学》。 二、二期止血缺陷的筛选检验 包括全血凝固时间、活化的部分凝血活酶时间及血浆凝血酶原时间，全血凝固时间见《临床基础检验学》，活化的部分凝血活酶时间及血浆凝血酶原时间介绍如下。 （一）活化部分凝血活酶时间测定 【原理】 在37℃条件下，以白陶土（激活剂）激活因子Ⅺ和Ⅻ，以脑磷脂（部分凝血活酶）代替血小板第3因子，在Ca2+参与下，观察贫血小板血浆（PPP）凝固所需的时间，即为活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time，APTT）。 【参考值】 男性：（37±3.3）s 女性：（37.5±2.8）s 【临床评价】 APTT是一个敏感且可靠的检查内源凝血系统的筛选试验。凡当血浆凝血因子低于正常水平的15%～Fg（尤其因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ）缺乏。 2．缩短 见于DIC，血栓前状态及血栓性疾病。 3．肝素治疗的监护 APTT对血浆肝素的浓度很为敏感，故是目前广泛应用的实验室监护指标。一般在肝素治疗期间，APTT维持在正常对照的（1.5～3.0）倍为宜。 (二)血浆凝血酶原时间测定 【原理】 在抗凝血浆中，加入足够量的组织凝血活酶（组织因子，TF）浸出液和适量的钙离子后，血浆凝固所需的时间即称为血浆凝血酶原时间（prothrombin time,PT） 【参考值】 1．平均值为（12±1）s，男性（11～13.7）s；女性（11～14.3）s。 2．凝血酶原时间比值（PT ratio ,PTR）= 被检血浆PT（s）/正常参比血浆（s） 参考值为1.00±0.15 3．国际标准化比值（international normalized ratio,INR）=PTRISI 参考值因国际敏感度指数（international sensitivity index,ISI） 【临床评价】 PT测定是外源凝血系统常用的筛选试验。 1．延长 PT超过正常对照3秒以上或PTR超过正常范围即为延长。主要见于：①先天性因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ减少及纤维蛋白原的缺乏（低或无纤维蛋白原血症）；②获得性凝血因子缺乏，如DIC、原发性纤溶亢进症、肝病的阻塞性黄疸和维生素K缺乏；③血循环中抗凝物质增多等。 2、缩短 见于高凝状态（DIC早期）及血栓性疾病，如心肌梗死、脑血栓形成、深静脉血栓及MM等。 3．PT及INR是监测抗凝剂用量的首选指标，国人的INR值以2.0～3.0为宜。 三、纤溶活性增强的筛选检验 包括优球蛋白溶解时间、血清纤维蛋白（原）降解产物检测及血浆D-二聚体检测～vWF:Ag）检测，兔疫火箭电泳法：在含vWF抗体的琼脂凝胶板中加入一定量受检血浆,在电场作用下，血浆中的vWF（抗原）在含抗体的琼脂板上泳动一定时间，出现抗原-抗体反应形成的火箭样沉淀峰，其高度与受检血浆中vWF的浓度成正相关。以此可计算出血浆vWF：Ag的含量。 【参考值】 94.1%±32.5% 【临床评价】 vWF：Ag检测是临床常用的较为敏感和实用试验之一，是研究和诊断vWD的重要指标。 1．减低 见于血管性血友病（vWD），是诊断vWD及其分型的重要指标之一。 2．增高 vWF是一种急性反应蛋白，在很多应激情况下都可增高，常见于血栓性疾，如病心肌梗死、心绞痛、脑血管病变、肾小球疾病、糖尿病、妊娠高血压综合征、大手术后等。 （二）血浆vWF瑞斯托霉素辅因子检测 【原理】 血浆vWF瑞斯托霉素辅因子（vWF ristocetin cofactor, vWF:Rcof）检测，在瑞斯托霉素存在的条件下，vWF与血板膜GPIb-Ⅸ相互作用，使血小板发生凝集。凝集的强度与受检血浆中vWF的量和（或）质有关。将混合正常人血浆作为100% vWF:Rcof，用缓冲液稀释成不同稀释度，不同稀释度混合正常血浆代替受检血浆在同样条件下测定血小板凝集反应。根据正常血浆的稀释度及其相应的透光度，绘制标准曲线。受检血浆的透光度从标准曲线中计算出受检血浆中vWF:Rcof的含量。 【参考值】 50%～150% 【临床评价】　本试验是检测vWF功能活性较敏感而实用的筛选试验，绝大多数vWD病例聚集率减低，而其它诱聚集诱导的血小板聚集率均正常，并且不同类型vWD血浆中vWF:Rcof的含量是不同的，Ⅰ型和Ⅲ型患者减低，ⅡB型正常，而Ⅱ型的其它亚型可减低。因此，本试验可作为诊断vWD及其分型的主要指标。 二、血浆内皮素-1检测 【原理】　血浆内皮素-1（endothelin-1,ET-1）检测，ELISA法：用抗兔IgG单抗包被固相载