生物科学毕业设计.doc

滨州学院 毕业设计（论文） 题 目 农杆菌介导F3′H基因对矮牵牛的遗传转化 独 创 声 明 本人郑重声明：所呈交的毕业设计(论文)，是本人在指导老师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，成果不存在知识产权争议。尽我所知，除文中已经注明引用的内容外，本设计（论文）不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体均已在文中以明确方式标明。 本声明的法律后果由本人承担。 ? 作者签名: 二〇 年 月 日 ? 毕业设计（论文）使用授权声明 本人完全了解滨州学院关于收集、保存、使用毕业设计（论文）的规定。 本人愿意按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版，同意学校保存学位论文的印刷本和电子版，或采用影印、数字化或其它复制手段保存设计（论文）；同意学校在不以营利为目的的前提下，建立目录检索与阅览服务系统，公布设计（论文）的部分或全部内容，允许他人依法合理使用。 （保密论文在解密后遵守此规定） 作者签名: 二〇 年 月 日农杆菌介导F3H基因对矮牵牛的遗传转化 本研究利用矮牵牛叶片作为愈伤组织诱导和转化的材料，通过对农杆菌介导梦幻系列矮牵牛的遗传转化体系的探索，将F3’H基因导入矮牵牛中，获得抗性植株，为通过基因工程手段进行矮牵牛的遗传改良奠定基础。关键词：矮牵牛；F3’H基因；根癌农杆菌；遗传转化 Agrobacterium-mediated F3 H genes transformation on Petunia genetics Abstract In this study，by using Petunia?leaf as the material of callus induction?and transformation and studying on Agrobacterium-mediated transformation system for Petunia dream hybrida, F3H gene was transferd into the petunia to obtain?resistant plants， the foundation for the genetic improvement of?Petunia through the means of genetic engineering. Key words：Petunia；F3’HAgrobacterium tumefaciens；Genetic transformatio目 录 引言 1 第一章 材料与方法 2 1.1材料 2 1.1.1植物材料 2 1.1.2农杆菌菌株和质粒 2 1.1.3试剂 2 1.1.4主要仪器设备 3 1.1.5培养基 3 1.2方法 3 1.2.1无菌苗的获得 3 1.2.2 叶片的消毒处理 3 1.2.3愈伤组织和不定芽的诱导 4 1.2.4生根诱导 4 1.2.5 抗生素敏感性试验 4 1.2.6 转化受体预处理 4 1.2.7 农杆菌活化 4 1.2.8 侵染 4 1.2.9 共培养 4 1.2.10 除菌 5 1.2.11 分化筛选和抗性植株的获得 5 第二章 结果与分析 5 2.1不同处理时间的消毒效果 5 2.2 愈伤组织诱导和不定芽分化的连续性 5 2.3 潮霉素对不定芽诱导和分化的影响 6 2.4 菌液浓度对转化的影响 6 2.5 乙酰丁香酮对转化的影响 7 2.6 抗性植株的获得 8 结论 9 参考文献 10 谢辞 11引言 通过分子生物技术将外源基因导入植物体中，获得一些品质优良、抗除草剂、抗病虫害的转基因植株，已经是现今作物育种的趋势。自80年代初美国首次培育出抗卡那霉素的烟草植物以来，随着基因工程技术的不断完善，许多农作物的转基因研究有了重大突破，观赏植物基因工程也随之迅速发展。Florigene 公司和Suntory公司向缺失DFR 的白色香石竹中导入矮牵牛F3′5′H 和DFR 基因，成功得到紫色转基因植株；向含有天竺葵色素和花青素的月季品种中引入F3′5′H基因，使花色转变为蓝色；将龙胆中编码F3′5′H 的基因转入烟草中，花色仅有略微的改变[1]。Robinson等人（1993年）和Zuke 等（1998年）分别利用反义技术将ACC氧化酶或ACC合成酶基因的反义序列导入香石竹中，获得的转基因切花寿命大大延长[2]。就其安全性而言，因为观赏植物仅供观赏而非食用，所以转基因观赏植物更容易实现商业化，显示出其特有的优越与潜力[3]。 花的颜色是观赏植物的重要经济性状，花的颜色主要由三大类群色素决定[4,5]：类黄酮（flavonoids）、类胡萝卜素（caro