[南方医科大学生化课件]3酶.ppt

基因工程研究所 刘 玥;酶学研究简史;酶学研究简史;1926年美国Sumner得到脲酶的结晶，并指出酶是蛋白质 （获1946年诺贝尔化学奖） ; 1982年美国T. Cech等人发现四膜虫的rRNA前体能在完全没有蛋白质的情况下进行自我剪切，发现RNA有催化活性。 ; 1983年美国S.Altman等研究RNaseP（由20%蛋白质和80%的RNA组成），发现RNaseP中的RNA可催化E. coli tRNA的前体加工。 ; Cech和Altman各自独立地发现了RNA的催化活性，并命名这一类酶为ribozyme（核酶），2人共同获1989年诺贝尔化学奖。 ;1995年，Jack W.Szostak研究室首先报道了具有DNA连接酶活性DNA片段，称为脱氧核酶(deoxyribozyme)。;酶的概念;几个有关名词; 酶促反应;酶的分子结构与功能;一、酶与医学的关系The Relation of Enzyme and Medicine;一、酶和疾病密切相关 ;（二）酶的测定有助于对许多疾病的诊断;在特定的条件下，每分钟催化1μmol底物转化为产物所需的酶量为一个国际单位。 ; 血清中酶含量增高原因： 组织器官受损造成细胞破坏、细胞膜通透性增高 细胞的转换率增高、细胞的增殖加快 酶的合成或诱导增强、酶的清除受阻;;（三）酶和某些疾病的治疗关系密切;二、酶在医学上的其他应用;葡萄糖;2．酶标记测定法是酶学与免疫学相结合的一种测定方法;3．工具酶广泛地应用于分子克隆领域;（二）酶的分子工程是方兴未艾的酶工程学;1．固定化酶是固相酶 ; 2．抗体酶是具有酶活性的抗体;二、酶的分子结构与功能The Molecular Structure and Function of Enzyme;酶的不同形式;多酶体系(multienzyme system)：由几种不同功能的酶彼此聚合形成的多酶复合物。;一、酶的分子组成中常含有辅助因子;全酶的结构与分子组成;全酶分子中各部分在催化反应中的作用:;辅助因子分类 （按其与酶蛋白结合的紧密程度）;辅酶和辅基并没有什么本质上的差别，二者之间也无严格的界限，只不过它们与酶蛋白结合的牢固程度不同而已。 体内酶的种类很多，而辅酶(基)的种类却较少，通常一种酶蛋白只能与一种辅酶结合，成为一种特异的酶，但一种辅酶往往能与不同的酶蛋白结合构成许多种特异性酶。 ;1.金属离子：最多见的辅助因子，常见的金属离子为 K+、Na+、Mg2+、Cu2+、 Cu+、 Zn2+、Fe2+、Fe3+等。;金属酶(metalloenzyme) 金属离子与酶结合紧密，提取过程中不易丢失。 金属激活酶(metal-activated enzyme) 金属离子为酶的活性所必需，但与酶的结合不甚紧密。 ;金属离子的作用： 参与催化反应，传递电子； 在酶与底物间起桥梁作用，便于密切接触； 稳定酶的构象； 中和阴离子，降低反应中的静电斥力等。;;;酶的活性中心(active center);必需基团(essential group) 酶分子氨基酸残基侧链的化学基团中，一些与酶活性密切相关的化学基团。;活性中心的常见基团： 　Ser残基的羟基（丝） 　Cys残基的巯基（半胱） 　His残基的咪唑基（组） 　Glu残基的γ-羧基（谷）　;活性中心内的必需基团;底 物 ;活性中心的构象特点： 在酶分子整个体积中只占比较小的一部分，是一个三维实体，或为裂缝，或为凹陷。 多为氨基酸残基的疏水基团组成的疏水环境，形成疏水“口袋”。;AChE的活性中心示意图;木瓜蛋白酶活性中心;溶菌酶的活性中心;酶的活性中心;三、同工酶; 同工酶存在于同一种属或同一个体的不同组织或同一细胞的不同亚细胞结构中，它使不同的组织、器官和不同的亚细胞结构具有不同的代谢特征。这为同工酶用来诊断不同器官的疾病提供了理论依据。 根据国际生化学会的建议，同工酶是由不同基因编码的多肽链，或由同一基因转录生成的不同mRNA所翻译的不同多肽链组成的蛋白质。 ;同工酶在体内的生理意义：主要在于适应不同组织或不同细胞器在代谢上的不同需要。 同工酶可能是机体对环境变化或代谢变化的另一种调节方式，即当一种同工酶受到抑制或破坏时，其他的同工酶仍然起作用，从而保证代谢的正常进行。 ;H;乳酸脱氢酶同工酶; LDH在各组织中酶谱的差异与组织利用乳酸的生理过程有关 心肌中： LDH1、LDH2较多，LDH1、LDH2与乳酸的亲和力较大，有利于乳酸脱氢氧化为丙酮酸，有利于心肌从乳酸获取能量。 骨骼肌和肝： LDH5、LDH4为主，LDH5、LDH4 与丙酮酸亲和力较大，有利于丙