高中生物选修3知识点.doc

生物选修3 专题1 基因工程 1.1 DNA重组技术的基本工具-1.2 基因工程的基本操作程序 【高考目标定位】 1、基因工程的诞生 2、基因工程的原理及技术 【考纲知识梳理】 一、与DNA分子相关的几种酶及基因工程的其他工具 1、与DNA分子相关的酶 限制酶 DNA连接酶 DNA聚合酶 解旋酶 作用底物 DNA分子 DNA分子片段 脱氧核苷酸 DNA分子 作用部位 磷酸二酯键 磷酸二酯键 磷酸二酯键 碱基对间的氢键 作用结果 形成粘性末端或平末端 形成重组DNA分子 形成新的DNA分子 形成单链DNA分子 2、载体 （1）条件： ①能在宿主细胞中稳定保存下来并大量复制。 ②有一个至多个限制性核酸内切酶切割点，以便与外源基因连接。 ③具有特殊的标记基因，便于筛选。 （2）种类： 质粒（常用）、γ噬菌体的衍生物、动植物病毒。 （3）作用： ①作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞内； ②利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。 二、基因工程基本操作程序[K] 1、目的基因的获取途径 （1）目的基因： 编码蛋白质的结构基因 。 （2）原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合成法。 （3）PCR技术扩增目的基因 ①原理：DNA双链复制 ②过程： 第一步：加热至90～95℃DNA解链； 第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链； 第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。 2、基因表达载体的构建 （1）目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。 （2）组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因 ①启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。 ②终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段 ，位于基因的尾端。 ③标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。 3、将目的基因导入受体细胞 生物种类 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 常用方法 农杆菌转化法 显微注射技术 Ca2＋处理法 转化过程 将目的基因插入Ti质粒的T—DNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞 的DNA→表达 将含有目的基因的表达载[高考资源网]a2＋处理细胞→微生物细 胞壁的通透性增加→重组 质粒与感受态细胞混合→ 感受态细胞吸收DNA分子 4、目的基因的检测与鉴定 （1）分子水平检测 ①导入检测：DNA分子杂交技术，即使用放射性同位素标记的含目的基因的DNA片段作探针。 ②表达检测： 转录检测：分子杂交法，即目的基因作探针与mRNA杂交 翻译检测：抗原─抗体杂交法 （2）个体生物学水平鉴定：对转基因生物进行抗虫或抗病的接种实验。 【要点名师精解】 基因工程的操作程序 1、获取目的基因的[高考资源网KS5U.COM] 2．目的基因与运载体结合（以质粒为运载体） 3．将目的基因导入受体细胞受体细胞：细菌 ↓氯化钙 细胞壁的通透性增大 ↓ 重组质粒进入受体细胞 ↓ 目的基因随受体细胞的繁殖而复制 实质 定向改造或生产人类所需的蛋白质 定向改造生物的遗传特性，以获得人类所需的生物类型或生物产品 结果 可产生自然界没有的蛋白质 只能生产自然界已有的蛋白质 结果 （1）蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程 （2）基因工程中所利用的某些酶需要通过蛋白质进行修饰、改造 【要点名师精解】 一、基因工程的应用 1、植物基因工程的应用 植物基因工程技术主要用于提高农作物的抗逆能力（如抗除草剂、抗虫、抗病、抗干旱和抗盐碱等）以及改良农作物的品质和利用植物生产药物等方面。 （1）提高抗逆性 ①常用抗虫基因：用于抗虫（杀虫）的基因主要是Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制剂基因、淀粉酶抑制剂基因、植物凝集素基因等。 ②常用抗病基因：a.抗病毒基因有：病毒外壳蛋白基因和病毒的复制酶基因；b.抗真菌基因有：几丁质酶基因和抗毒素合成基因 ③其他抗逆基因：环境条件对农作物的生产会造成很大影响，并且这些影响是多方面的，因此，抗逆性基因也有多种多样，如：抗盐碱和干旱的调节细胞渗透压基因、抗冻基因、抗除草剂基因等等。 （2）改良植物品质 由于人们的食品含有的营养不平衡，不能满足人们对食品的要求，这样，可以通过转基因技术，使植物能够合成某些本来不能合成的物质。如科学家将必需氨基酸含量多的蛋白质编码基因导入植物中，或者改变这些氨基酸合成途径中某种关键酶的活性，以提高氨基酸的含量。 （3）生产药物 基因工程不但促进了传统技术的变革，也为人类提供了传统产业难以得到的许多昂贵药品，