2010年毕业论文任务书.doc

东海科学技术学院 毕业论文（设计）任务书 表1 姓 名 吴月钢 专业 生物科学 班级 C06生科（2） 题 目 曼氏无针乌贼血蓝蛋白的克隆与表达—总RNA的提取与检测 题目来源 科研生产 指导教师 刘慧慧 职称 讲师 任务下达日期 2010年 2 月 15 日 论文（设计）起止日期：2010年2月16日 至2010年6月1日 学生（签名）： 毕业论文（设计）计划任务（目的、任务、计划进度、措施、预期结果）： （1）目的、任务：本课题通过对曼氏无针乌贼体内血蓝蛋白进行克隆与表达寻找合适的方法和载体并通过基因工程的手段实现血蓝蛋白的转基因生产和研究，为今后更深入血蓝蛋白.09——2009.12 查找文献资料，确定实验方案。 实验阶段：2010.01——2010.04 准备仪器、配制溶液、总RNA提取与检测。 结果处理阶段：2010.04——2010.05 数据处理，结果分析。 总结撰写阶段：2010.05——2010.06 完成毕业论文，论文答辩。 （3）措施：取自舟山秀山岛乌贼养殖基地的曼氏无针乌贼，采用Trizol法从曼氏无针乌贼的淋巴、鳃心和脑组织中抽提取得到总RNA，经过反转录得到cDNA作为模板，管家基因β-actin扩增cDNA的完整从曼氏无针乌贼的淋巴、鳃心和脑组织中抽提取得到总RNA，检测得到28S和18S两条清晰亮带，经过反转录得到cDNA作为模板，经PCR扩增得到明显的约260bp管家基因β-actin扩增图谱，进一步证实所得cDNA完整，可作为获得血蓝蛋白基因的模板，进一步用于血蓝蛋白的克隆与表达研究。[1] SpanA A,Huang T S,Cerenius L,et al.cDNA clong of proohenoloxidase from the fresh crayfish Pacif astacus leniusculus and its activation[J].PNAS,1995,92(4): 939-943. [2] 施宝忠, 杨群. 血蓝蛋白分子的结构, 分类及其在进化上的演变[J]. 科学论坛, 2006, 25(1): 37-39. [3] Bak H J,Beintema J J.Panulirus interuptus hemocyanin:The elucidation of the complete amino acid sequence of subunit a[J]. Eur J Biochem,1987,169: 333-348. [4] 章跃陵, 刘光明, 王三英, 等. 南美白对虾血蓝蛋白与抗人IgG相互作用的研究[J]. 汕头大学学报(自然科学版), 2005, 20(2): 32-36. [5] 章跃陵, 卓奕明, 朱永飞, 等. 凡纳滨对虾人工感染细菌后肝胰脏中主要变化蛋白的研究[J]. 水产科学, 2005, 24(6): 19-23. [6] Zhang Y L,Wang S Y,Xu A L,et al.Affinity proteomic approach for identification of an IgA-like prorein in Litopenaeus vannamei and study on its agglutination characterization[J].J Proteome Res,2006,5(4): 815-821. [7] Lei Kaiyu, Li Fang,Zhang Mingchang,et al.Difference between hemocyanin subunits from shrimp Penaeus japonicus in anti WSSV defense[J]. Dev Comp Immunol,2008,2(4): 10-7. [8] Lee S Y,Lee B L,Sederh all K.Processing of an antibacterial peptide from hemocyanin of the freshwater crayfish Pacif astacus leniusculus [J]. J Biol Chem,2003,278: 7927-7933. [9] 李义, 吴婷婷, 李红霞. 甲壳动物抗微生物肽研究进展[J]. 水生生物学报, 2006, 30(4): 21-24. [10] Pless D,Aguiar M,Falcon A,et al.Latent phenoloxidase activity and N2 terminal amino acid sequence of hemocyan