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草木樨状黄芪A4转化系原生质体培养研究.pdf
2009年第8期
草木樨状黄芪A4转化系原生质体培养研究
张改娜h¨，贾敬芬2
(1．河南科技大学农学院，河南洛阳471000，2。西北大学生命科学学院，陕鹾蹶安710069)
摘要：建立了草木樨状黄芪A。转化系原生质体再生植株的实验体系。以草木樨状黄茂发根农杆
茵A。转化系再生植物幼叶为材料，通过酶解汝，游离出大量有活力的原生质体，原生质体经培养
持续分裂形成了愈伤纽织，并分纯虫秀生营。比较了不麓酶解时麓、培养密度和培养基酵原生震侉
分裂和再生植株的影响。结果表明，原生质体植板密度为3×105个／mL，采用液体浅层培养，在附
6一BA、0．3mol／L甘露醇和2％蔗耱的DPD培养基中，可获得最
加了2．0mg／L2，4一D、0．5mg／L
高分黎频率，这32．4％。艨童质体持续分裂形成愈伤组织可高额【(91．75±3．1)％]分化虫再生
苗。甘露碱纸电泳和PCR分析表明，外源基因T—DNA在原生质体来源的再生植株中仍然存在。
关键词；草木樨状黄芪；原盎质体培纂；再生植糠
中图分类号：S541+．9文献标识码：A
Studieson CultureandPlant
MesophyllProtoplast
of
RegenerationAgrobacterium
melilotoidesPall。
Astragalus
ZHANGGai—mRl·扣．JIA
Jing-fen2
of ofHenan ofScienceand 471000，China；
(1．CollegeAgricultureUniversity Technology，Luoyang
2。SchoolofLifeScience，Northwest 710069，China)
University，Xi’an
efficient from of rhizo—
Abstract：An for
protocolplantregenerationprotoplastsAgrobacterium
melilotoidesPall。wasestablishied．TheleavesfromA．
Astragalus
genes—transformed young
A．melilotoidesPall．wereusedfor isolation
rhizogenes—transformed protoplast throughenzyme
effectofdifferent timeand densitiesandmediaon
digestion．The enzymedigestion plating proto—
divisionsand werestudied．Thedivision
plast plantregeneration highest frequency(32．莲％and
sustainedcelldivisionswereobtainedin a
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