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２.小分子抗体 　　为了解决穿透性问题，对抗体改造，保留抗原结合位点，成为小分子抗体，分为下面５种： 　a.Ｆab抗体　抗体的Ｆab片段由重链的Ｖ区和Ｃm区与轻链以二硫键相连，能发挥抗体的抗原结合功能，大小为完整抗体的１／３。 　b.单链抗体　将抗体的ＶＨ和ＶＬ用连接肽连接，形成具有　抗原结合能力的单链抗体多肽，即所谓的单链抗体（ＳcＦv）。其大小仅为完整抗体的１／６，免疫原性弱，药物动力学优于Ｆab片段和完整抗体，能有效到达完整抗体无法达到的靶部位。 　c.单域抗体　抗体结合抗原的部位主要在Ｖ区，只含有Ｖ区的小分子抗体，如ＶＨ或ＶＬ，也能保持原单克隆抗体的特异性，这种小分子抗体称为单域抗体，其大小为完整抗体的１／１２，其只有一个功能区，制备简单，更容易穿过靶细胞。 　d.超变区多肽　由单个ＣＤＲ多肽构成的小分子抗体称为超变区多肽，其只有１６～３０个氨基酸，具有与抗原结合的能力，穿透力极强。但亲和力低，稳定性不高，实际应用有很大局限性。 　e.双体抗体　将两种不同抗体的ＶＨ区和ＶＬ区通过连接肽（５～１０个氨基酸）连接，形成“杂交”的单链抗体称作双体抗体（diabody），也称双特异性抗体。在宿主细胞中表达后，２条链自动折叠，形成双特异性的抗体片段，其大小为ＩgＧ的１／３或Ｆab的１／２，是相对分子质量最小的双功能抗体，在免疫诊断和治疗方面有广阔的应用前景。 ３.双功能抗体 双功能抗体的定义：天然的抗体分子是双价单特异性的，将小分子抗体（如Ｆab或Ｆv）与其他蛋白如毒素、酶、细胞因子及受体分子连接在一起，可形成一种新型分子，这样的杂和分子称双功能抗体。 双功能抗体即可以与靶位点结合，又可将特定的活性分子导向特定部位，发挥其生物学功能，如杀死肿瘤细胞、发挥催化功能等。 将人细胞受体或黏附分子与抗体的恒定区（主要是Ｆc片段）的Ｎ段连接，形成免疫黏连素，既可发挥抗体的效应功能，又能发挥细胞黏附功能。对于杀伤缺少相应表面抗原的肿瘤细胞有一定意义，可减少肿瘤的免疫逃逸。 ４.人源性抗体 　制备人源单克隆抗体的２种方法： 　a.噬菌体抗体库　噬菌体抗体库技术是噬菌体表面展示技术在基因工程抗体应用上的一个成功范例； 　　　通过噬菌体表面展示技术，可将目的蛋白或多肽的编码基因与编码Ｍ１３噬菌体颗粒末端蛋白的基因Ⅲ构建成融合基因，将含有融合基因的重组Ｍ１３噬菌体转染大肠杆菌，可以在噬菌体颗粒表面展示目的蛋白。（图１８－５） b.人源性抗体转基因小鼠 通过构建转基因小鼠，可使小鼠产生人源性单克隆抗体。用人的抗体基因转入小鼠并替代小鼠的相应基因，产生能分泌人抗体的转基因小鼠，第一个获得的人源性抗体是抗破伤风类毒素的单克隆抗体。 在转基因小鼠基础上，建立了一种产生人抗体的小鼠模型ＸenoＭouse。将小鼠的全套抗体基因敲除掉，同时将人的大部分轻链和重链基因插入到小鼠的染色体中，当用抗原刺激小鼠时就可产生人源性抗体。利用该模型已制备了多种类型的人单克隆抗体，如抗人表皮生长因子受体的人源性抗体。 ５.基因工程抗体的产生 ⑴　大肠杆菌表达系统 ⑵　酵母表达系统 ⑶　哺乳动物表达系统 ⑷　植物表达系统 ⑸　昆虫表达系统 　第四节　核酸类药物 一.反义核酸药物 反义核酸是一些人工合成的单链反义分子，可以通过碱基互补原则与被感染细胞内的某个靶标mＲＮＡ或ＤＮＡ结合，抑制或封闭该基因的转录和表达，或切割mＲＮＡ使其丧失功能。 反义核酸作为药物可以治疗正常蛋白超量表达的疾病，如癌症，炎症，病毒或寄生虫感染。 根据组成的特点可将其分为反义ＲＮＡ，反义ＤＮＡ，肽核酸和核酶。 １.反义ＲＮＡ 机理：利用反义ＲＮＡ可以与mＲＮＡ结合形成互补双链，阻断核酸蛋白体同mＲＮＡ的结合，从而抑制了mＲＮＡ翻译成蛋白质的过程。 反义ＲＮＡ在细胞核中与mＲＮＡ结合后会干扰其加工和剪切，如加帽和加poly（Ａ）尾，还会干扰mＲＮＡ转运至细胞质。反义核酸和mＲＮＡ结合后还使得mＲＮＡ更加易被核酸识别而降解，从而大大缩短mＲＮＡ的半衰期。反义ＲＮＡ除了可以影响基因的表达外，还可与引物ＲＮＡ前体互补结合，从而抑制ＤＮＡ复制。 反义ＲＮＡ可以人工合成，更多的是将目的ＤＮＡ以反方向插入载体通过反义表达载体产生。通过这些载体可用于研发新型，高特异性和高效的反义治疗药物，在治疗艾滋病和麻疹以及恶性肿瘤方面起到了一定作用。 ２.反义ＤＮＡ 反义ＤＮＡ的定义：也称反义寡核苷酸或反义脱氧核苷酸，是一种人工合成的，能与mＲＮＡ互补的，用于抑制翻译的短小反义核酸分子。 反义ＤＮＡ与mＲＮＡ结合后还可以诱导ＲＮaseＨ的产生，降解ＤＮＡ－ＲＮＡ复合物中的ＲＮＡ，从而大大缩短了mＲＮＡ的半衰期。 反义ＲＮＡ可以通过自动合成仪，但其很易被降解，为提高其稳定性，亲和力，降解靶核酸的能力以及其他性能，由此催