丝核菌菌株GXE4中独立于染色体外遗传因子的发现及其稳定性的分析.docVIP

  丝核菌菌株 GXE4 中独立于染色体外遗传 因子的发现及其稳定性的分析# 5 10 15 20 25 30 35 40  摘要：水稻纹枯病严重制约水稻的产量和品质,已成为水稻上的首要病害。本论文对丝核菌 弱毒菌株 GXE4 的生物学特性及其独立于染色体外遗传因子的稳定性进行了详细的研究。研 究结果表明菌株 GXE4 具有生长速度缓慢、产菌核少及不能侵染水稻叶片等弱毒特性。提取 该菌株基因组 DNA，发现菌株中含有独立于染色体和线粒体 DNA 外大小为 3.6kb 的遗传因子 （3.6kb-frags）。采用化学处理、抗生素消除、原生质体再生、菌丝顶端及单菌核分离等 策略处理菌株 GXE4 的菌丝，结果表明遗传因子 3.6kb-frags 不能被消除，该因子可以稳定 存在菌株 GXE4 中。 关键词：纹枯菌；稳定性；遗传因子 中图分类号：S436.63 Discovery and analysis on stability of extrachromosomal genetic elements in Rhizoctonia solani strain GXE4 Xie Jiatao, Fu Yanping, Cheng Jiasen, Jiang Daohong (College of Plant Science and Technology, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070) Abstract: Rice sheath blight is a particularly important component of rice disease complex and makes great losses to the yield and quality of rice. In this paper, a fungal strain of Rhizoctonia solani, GXE4, isolated from Guilin was studied in detail. Compared with normal R. solani strain, strain GXE4 produced abnormal pigment and less sclerotia, grew more slowly, and was much difficult to produce sclerotia. GXE4 also lost the ability to infect rice when inoculated with hyphal agar. The genomic DNA of GXE4 was extracted. The result revealed that there exsited extra linear chromosomal elements (3.6kb-frags) which were proved to be very stable when GXE4 was treated with antibiotic, protoplast regeneration, isolation of hyhal tips or sclerotia and chemical, respectively. Key words: Rhizoctonia solani; stability; extrachromosomal elements 0 引言 在水稻种植过程中，水稻纹枯病是水稻上的一种重要病害。近年水稻种植密度大、生长 周期短，氮肥施用量大，导致稻株长势过旺，抗病力下降；同时田间湿度过大，为水稻纹枯 病的发生创造了良好的小生态环境，造成稻纹枯病流行，使水稻的产量和品质受到严重影响 [1-3] 引起水稻纹枯病的病原菌无性阶段为茄丝核菌（Rhizoctonia solani Kühn），在分类上属 于半知菌亚门、丝孢纲、无孢目、丝核菌属。有性阶段为瓜亡革菌（Thanatephorus cucumeris Donk），该病原菌寄主范围广，可侵染水稻、玉米、小麦等农作物以及几乎所有的蔬菜作 物[4]，自然寄主有 15 科近 50 种植物，在人工接种的条件下可侵染 54 科 210 种植物。水稻 纹枯病菌是一种在土壤中可以顽固存活的病原菌，它不产生无性孢子，常在侵染后期于寄主 -1-   病残体上产生休眠体菌核，以之越冬，也可以以菌丝形式于病残体或病组织内越冬。菌核是 重要的初侵染源，可以在土壤中长期存活，而在室温下保存 11 年仍然有 12 %的萌发率[5]。 菌核无休眠期和后熟期，一旦条件适宜可萌发侵染致病，不同发育阶段的菌核均能萌发致病 45