原创力文档- 1、本文档共12页，可阅读全部内容。
- 2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
单向免疫扩散试验 沉淀反应（precipetaiton）是可溶性抗原与相应抗体特异性结合所出现的反应。 1905 凝胶内沉淀试验 1946 试管免疫扩散技术 1965 单向免疫扩散技术 1967 散射比浊法 在琼脂胶中混入一定量抗体，使待测的抗原溶液从局部向琼脂内自由扩散，在抗原抗体比例合适区域内形成可见的沉淀环。(抗原抗体反应时，只有其中一种成分发生扩散） 根据试验形式可分为试管法和平板法两种。 测量沉淀环的直径或计算环的面积。沉淀环直径或面积的大小与抗原量相关，但不是直线相关，而是对数关系。同时，这种沉淀环与分子量和扩散时间有关。 试剂与器材 1.羊抗人IgG诊断血清 2.人IgG标准液（30g/L） 3.待测人血清 4.琼脂粉 5.生理盐水 6.载玻片(玻璃板）、三角烧瓶、吸管、加样器、打孔器、水浴箱、湿盒、直尺等 操作方法 1.制备琼脂凝胶 （1）生理盐水配制琼脂凝胶（15g/L），煮沸溶化至澄清，置56℃水浴中备用。 （2）取适量溶化琼脂，以琼脂∶抗体＝4 ∶1比例吸取相应抗体，与琼脂充分混合，置56℃水浴中备用。 2.制板 （1）取洁净干燥玻片，置于水平台上 （2）用吸管吸取4ml琼脂（含抗体），于载玻片1/3处浇注，使琼脂凝胶均匀铺满玻片，不要留有气泡。 3.打孔 待琼脂凝固后，用直径3mm的打孔器打孔，孔距10～12mm 4.加样 用微量加样器吸取待检血清10μl,加入相应的试验孔中，做好标记。 将人IgG标准液（30g/L）用生理盐水分别做如下稀释：原倍， 1:2， 1:5， 1:10， 1:20， 1:30，用微量加样器吸取稀释标准液10μl,加入相应的试验孔中，做好标记。 5.扩散 将加样的琼脂凝胶板平放于湿盒内，置37℃24h后观察结果。 结果判断 精确测量各试验孔沉淀环的直径，以沉淀环直径为横坐标，相应孔中IgG含量的对数为纵坐标，绘制标准曲线。(logC/d=K) 注意事项 1.玻片须干燥、洁净，边缘无破损。置水平处。 2.浇制琼脂板时动作要匀速 3.打孔时避免水平移动 4.加样时避免气泡或加至孔外，加样要准确 5.应同步绘制标准曲线 6.抗血清与溶化琼脂混合时，温度应控制在56℃ * *
文档评论（0）