十九章 DNA复制、修复与重组.pptVIP

第十九章 DNA复制、修复与重组 第一节 DNA的复制总观 一、DNA的半保留复制 1958年 Meselson 和 Stahl 应用同位素标记法和 CsCl 密度梯度超离心技术研究 E. coli DNA复制时，才证实半保留复制机制是正确的。 用重氮（15N）标记的 15NH4Cl 作为唯一氮源培养E. coli 15代，使所有细菌 DNA 都带有 15N 标记，然后将这些细菌转移到含轻氮（14N）标记的 14NH4Cl 培养基上培养，按不同时间取样品，每个样品都用 SDS 裂解细胞，裂解液中 DNA 的密度借助平衡密度梯度超速离心来检测。（图19-1.ppt） 二、复制子、复制起始电与方向 （一）复制子的含义与方向 基因组能独立进行复制的单元称复制子。对于原核生物复制子，它含有控制复制开始的起点包括其控制元件。一旦复制起始，随即延伸直至到达停止复制的终点，而完成整个复制子的复制。 复制的方向大多是双向的并形成两个复制叉。少数是单向复制的，只形成一个复制叉（图19-2.ppt）。 第二节 原核生物DNA的复制 参与DNA复制的酶主要有DNA聚合酶和连接酶。 E.coli DNA聚合酶有三种：DNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ。 三种酶都具有多重酶活性（聚合、外切），催化的聚合反应速率有很大差别。 一、DNA聚合酶 I 的性质 E. coli DNA 聚合酶I是一个多功能酶，具有几种催化