谷氨酸、柠檬酸生产.ppt

4）供氧 ? 在菌体生长期 供氧必须满足菌体呼吸的需氧量 ? 谷氨酸生成期 应充分供氧（在细胞最大呼吸速 率时，谷氨酸产量大） 发酵控制 三） 谷氨酸提取 等电点法 离子交换法 金属盐法 盐酸水解— 等电点法 离子交换膜电透析法 国内多采用等电点—锌盐法 该法收率可达85～90% 工艺流程 等电点法母液 加 ZnSO4 加NaOH调pH6.3 含锌废液 （处理或综合利用） 谷氨酸锌盐 加水 调pH至2.4 湿谷氨酸 锌盐母液 谷氨酸 洗水 水洗离心 工艺流程 谷氨酸 中和 湿谷氨酸：纯碱 Na2CO3= 1 ：0.3-0.34 60℃; pH6.9 - 7.0 ; 浓度21-23 波美度 除铁、锌 加Na2S , 生成硫化亚铁、硫化锌沉淀 中和液脱色 湿谷氨酸：活性碳 = 1 ： 0.01; 搅拌30分钟，自然沉淀 浓缩结晶 结晶锅；真空度600mmHg以上；温度65℃以下；当锅内浓度达31.5 波美度时，用真空吸入晶种起晶、育晶、养晶 分离、干燥、筛分、混盐 分离：晶液8000-10000每分钟转数 干燥：温度80 ℃ 筛分：采用8、12、20、30四种目孔 味精生产中常见的几个质量问题 味粉混浊 硫化物过量 消泡油过量 夹带DL-谷氨酸钠 原材料质量差（如纯碱含杂质多） 产生焦谷氨酸钠 （正常带1分子水） 中和、脱色温度高 味精烘干温度过高 浓缩结晶过程温度过高、时间长 各道母液循环次数多 * * 谷氨酸的发酵生产 一、谷氨酸生产菌 1、主要菌株 棒状杆菌属 (Corynebacterium) 短杆菌属 (Brevibacterium) 小杆菌属 （Microbacterium） 节杆菌属 (Arthrobacter) 国内常用菌株： 北京棒杆菌 AS1.299 、7338、 S-941、D110 钝齿棒杆菌 AS1.542、 HU7251、 B9 天津短杆菌 T6-13、 FM-8207、 U-9 、TG-3 、TG-866、 D85 2、谷氨酸生产菌的主要特征 1）G+、无芽孢、无鞭毛、不运动； 2）都是需氧型； 3）多为生物素缺陷型； 4）不分解淀粉、纤维素、油脂、酪蛋白等； 5）发酵中菌体发生明显的形态变化，同时发生细胞膜渗透性的变化； 6） 二氧化碳固定反应酶系活力强； 7）异柠檬酸裂解酶活力欠缺或微弱、乙醛酸循环弱； 8）?-酮戊二酸氧化能力缺失或微弱； 9）柠檬酸合成酶、乌头酸酶、异柠檬酸脱氢酶、谷氨酸脱氢酶活力强； 10）具有向环境中泄漏谷氨酸的能力； 二、谷氨酸发酵机制 1、生成谷氨酸的主要反应 1) 谷氨酸脱氢酶(GHD)催化的还原氨基化反应 GHD ?-酮戊二酸 + NH4+ + NADPH2 ——→ 谷氨酸 + H2O + NADP 2) 转氨酶催化的转氨反应 3) 谷氨酸合成酶(GS)催化的反应 2、谷氨酸生物合成途径 酵解途径 (EMP) 己糖一磷酸途径 (HMP) 三羧酸循环 (TCA) 乙醛酸循环 二氧化碳固定反应 TCA循环 柠檬酸合成酶 顺乌头酸酶 异柠檬酸脱氢酶 ?-酮戊二酸脱氢酶复合体 谷氨酸脱氢酶 由葡萄糖合成谷氨酸的代谢途径 乙醛酸循环 TCA 循环的一条回补途径 柠檬酸裂解酶、苹果酸合酶 CO2固定 谷氨酸合成的理想途径 谷氨酸积累机理： 1）谷氨酸产生菌丧失或仅有微弱的?-酮戊二酸脱氢酶活力，使?-酮戊二酸不能继续氧化；但谷氨酸脱氢酶活力很强，同时NADPH2再氧化能力弱，这样就使?-酮戊二酸到琥珀酸的过程受阻；在有过量铵离子存在时， ? -酮戊二酸经氧化还原共轭的氨基化反应而生成谷氨酸。 2）谷氨酸产生菌大多为生物素缺陷型，谷氨酸发酵时通过控制生物素亚适量，引起代谢失调，使谷氨酸得以积累。 3）生成的谷氨酸不形成蛋白质，而分泌泄漏于菌体外。 4）谷氨酸产生菌不利用菌体外的谷氨酸，而使谷氨酸成为最终产物。 但是，当环境条件发生变化时，菌体的生物代谢也会发生变化，谷氨酸发酵会向其他发酵转换，谷氨酸积累减少，而其他副产物积累量增加。 例如： 溶氧 适中 不足 过量 产生谷氨酸 产生乳酸 产生?-酮戊二酸 磷酸盐 适中 过量 产生谷氨酸 产生缬氨酸 3、控制细胞膜的通透性 谷氨酸发酵的关键在于发酵培养期间谷氨酸生产菌细胞膜结构与功能上的特异性变化，使细胞膜转变成有利于谷氨酸向膜外渗透的样式，即完成谷氨酸非积累型细胞向谷氨酸积累型细胞的转变。这样，由于终产物谷氨酸不断地排出细胞外，使细胞