繁殖障碍母猪与健康母猪猪瘟抗体水平比较与分析.pdfVIP

· 26 · 《上海 畜牧兽 医通讯》 2011年第 5期 繁殖 障碍母猪与健康母猪猪瘟抗体水平比较与分析 杨小燕 。 戴爱玲 。 李晓华 黄思琼。 (1龙岩学 院生命科学学院 2预 防兽 医学与生物技术重点实验室 3福建省人畜寄生与病 毒性疫病防控工程技术研究中心 福建 龙岩 364000) 随着养猪业集约化和规模化发展 ，猪病 的防治难度在不 1．3 猪瘟病毒抗体检测 断增大，尤其是猪繁殖障碍性疾病 的发生 ，严重制约着规模 猪瘟病毒抗体检测方法按试剂盒操作说 明书进行 。 化养猪业 的健康发展。繁殖障碍性疾病主要特点是引起母 1．4 猪 瘟抗原检 测 猪不育或受胎率低 ，妊娠母猪流产、早产 ，产死胎、木乃伊胎 1．4．1 ELISA 方法 ：猪瘟病毒抗原检测方法按试剂盒操作 和弱仔 ，或者有些母猪 出现哺乳性能低 、出生小猪拉稀等症 说 明书进行 。 状 。母猪繁殖障碍 的病 因很多，有传染性和非传染性，传染 1．4．2 RT_PCR方法 ：根据 GenBank上发表 的 CSFV E2基 性的如猪瘟 、猪伪狂犬病 、猪繁殖与呼吸综合征、猪细小病毒 因，扩增长度 CSFV为 288bp，引物 由上海生工合成 。引物的 病 、日本 乙型脑炎 、猪 圆环病毒病 、衣原体 、布 氏杆菌病等 。 序列如下 ：CSFV上游 引物 ：5-caggtatgcgatctcgtcaacca一3；下 非传染性因素如营养、环境、霉菌毒素、药物和管理等 ，其临 游 引物 ：5-gggcacagcccaaatccgaagt一3。全血 中病毒 RNA 的 床症状和病理变化表现复杂 ，临床上难 以鉴别 。特别是 由病 提取参照 TRIZOLRNA提取试剂说 明书进行；csFVcDNA 原性的传染性因素引起 的繁殖障碍存在严重 的混合感染现 的合成采用 2O l反转录体系，反转录引物利用随机 弓l物。 象 。陆文俊等 “运用 了PCR和 RT—PCR技术对广西 12个 具体方法参照 TaKaRa公司的 M—MLV反转录酶系统说 明 种猪场 113份母 猪流产病料进行 CSFV、PRRSV、PRV 和 书进行 。以病毒 cDNA为模板进行 PCR扩增 。反应体系为 PPV检测调 查，结 果显 示 混合感 染 样 品 占总样 品数 的 25 1，其 中10×PCR缓冲液 (Mg2 plus)2．5 l，2．5mmol／I 25．7 ，PRRSV+CSFV和 CSFV+PPV 混合感染最为严 dNTP1．6 l，10v．mol／LCSFV上下游 引物 0．8 l，TaqDNA 重 。贾斌等 也报道证实了混合感染的严重性 。此外 ，引起 聚合酶 0．25 l，CSFV模板适量 ，用灭菌水补足25 1。扩增程 繁殖障碍病的猪瘟 、猪伪狂犬病 、猪繁殖与呼吸综合征、猪 圆 序为 ：94℃预变性 5min，94℃ 1min，57℃ 1min，72℃ 环病毒病 以及 日粮 中的霉菌毒素严重损害猪 的免疫系统，引 1min，30个循环 ，72℃延伸 10min，用 1．0 琼脂糖凝胶 电泳 起免疫抑制 。研究表 明受 PRRSV感染 的无特定病原 (SPF) 检查 PCR产物 。 的猪接种猪瘟疫苗 ，猪瘟抗体水平明显低于无感染 PRRSV 1．5 重新免疫试验 的对照猪。。繁殖障碍母猪存在在猪场排毒、散毒 的可能， 对猪瘟抗体检测不合格 的所有种猪 ，每头肌 肉注射兔源 在饲养管理上具有 占栏、饲料及药费成本 ，以及 出生猪死亡 猪瘟弱毒脾淋苗 2头份 ，30~40d后采血 ，分离血清 ，用 同样 或饲养中后期死亡等潜在的经济损失。所 以对于繁殖障碍 的方法再次检测猪瘟抗体 。 这种疾病 ，确诊需要进行实验室检验 。在实际生产 中，许多 2 结果与分析 大型的规模化猪场都有定期的母猪淘汰计划 ，如果对每头母 2．1 不 同胎 次母猪猪瘟抗体检测