早幼粒白血病-维甲酸受体α 融合蛋白对RIAM 基因转录的负调控作用探讨.pdfVIP

肿瘤2012 年10 月第32 卷第10 期　TUM OR Vol. 32, October 2012　　 767 DOI: 10.3781/j .issn.1000-7431.2012 .10.002 Copyright© 2012 by TUM OR Basic Research 基础研究 · α 早幼粒白血病-维甲酸受体 融合蛋白对RIAM 基因转录的负调控作用 探讨 赵旭杰，朱雪花，张　济，王侃侃 上海交通大学医学院附属瑞金医院医学基因组学国家重点实验室，上海　200025 α [摘要]　目的：研究异常转录因子早幼粒白血病- 维甲酸受体 （promyelocytic leukemia-retinoic acid receptor alpha ，PML-RARα）融合蛋白对RIAM 基因的转录调控机制。方法：利用表达谱数据库 （GSE1159 ）比较 RIAM 基因在急性髓系白血病 （acute myeloid leukemia ，AML ）各亚型中的表达情况，以及RIAM 基因和PML- RARα融合蛋白之间的相关性。采用蛋白质印迹法和实时荧光定量-PCR 法分别检测PML-RARα融合蛋白和 RIAM 基因在急性早幼粒细胞白血病 （acute promyelocytic leukemia ，APL ）模式细胞株PR9 及APL 患者来源的 细胞株NB4 中的表达情况，以及在全反式维甲酸 （all-trans retinoic acid ，AT RA ）处理前后的RIAM mRNA 的 表达情况。利用染色质免疫沉淀技术检测细胞内PML-RARα融合蛋白在RIAM 基因启动子附近的结合情况。结 果：RIAM 基因在APL （即M3 型AML ）中的表达水平明显低于其他AML 亚型 （M0 、M1、M2 、M4 、M5 和M7 型）和正常造血细胞 （ α P ＜0.05 ）。随着PML-RAR 融合蛋白的表达，RIAM 基因的表达水平明显降低。 AT RA 能激活RIAM 基因的表达，且PML-RARα融合蛋白的表达能增强AT RA 对RIAM 基因表达的激活效应。 PML-RARα融合蛋白结合在RIAM 基因的启动子区域。结论：RIAM 基因是PML-RARα融合蛋白的靶基因， PML-RARα融合蛋白通过结合到RIAM 基因的启动子区域对其转录进行负调控。 [关键词]　白血病，早幼粒细胞，急性；调节元件，转录；融合蛋白类，PML-RARα；RIAM 基因 [中图分类号]　R733.71 [文献标志码] A [文章编号]　1000-7431 (2012) 10-0767-08 α The transcriptional downregulation of RIAM gene mediated by PML-RAR fusion protein ZHAO Xu-jie, ZHU Xue-hua, ZHANG Ji, WANG Kan-kan State Key Laboratory of Medical Genomics, Ruijin Hospital, Shanghai Jiaotong University School of Medicine, Shanghai 200025, China [A BSTRACT]　Objective: To investigate the effect of transcriptional regulation of aberrant transcriptio