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中国农业科学 2013,46(6):1104-1113
Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.06.003
利用RNAi 技术抑制籽粒PPO 合成改良小麦面粉白度的研究
1,2,4 2 1 1 1 3 2 1
孙重霞 ，杨凤萍 ，张 婷 ，隋晓燕 ，梁荣奇 ，LIU Qing ，张晓东 ，李保云
1
（中国农业大学农学与生物技术学院/农业生物技术国家重点实验室/农业部作物基因组与遗传改良重点实验室/北京市作物遗传改良重点实验室，
2 3
中国北京 100193；北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心，中国北京 100097；Commonwealth Scientific and Industrial Research Organization,
4
Plant Industry, P.O. Box 1600, Canberra, ACT 2601, Australia ； 首都师范大学生命科学学院，中国北京 100037）
摘要：【目的】通过RNAi 策略抑制小麦籽粒ppo 的表达，获得籽粒PPO 酶活性低、白度高的转基因小麦新种
质。【方法】构建了以小麦胚乳特异表达启动子1Dx5 启动子驱动的籽粒ppo 的RNAi 载体pBAC47P-ppoIR，利用基
因枪将该载体与含bar 的表达载体基因枪共转化中优9507 幼胚愈伤组织，获得T 转基因植株。通过分子鉴定（PCR、
0
Southern 杂交、半定量RT-PCR、Northern 杂交）、酶活筛选和白度测定等方法对转基因植株及其后代株系进行筛
选。【结果】获得了27 株阳性T 转基因植株。转基因植株及其后代经PCR 和Southern 杂交检测表明，RNAi 构件
0
已经稳定整合到T 的12 个株系中。半定量RT-PCR 和Northern 杂交结果表明有20 株T 籽粒中ppo 表达水平明显
1 2
低于对照。对转基因T 灌浆期籽粒进行PPO 同功酶活性分析表明，有6 个株系的PPO 活性有所减弱。对T 籽粒的
2 4
面片白度测定表明，5 个株系的白度均比对照有所提高，其中2 个株系效果显著。【结论】RNAi 技术的表达能抑制
籽粒ppo 表达，降低PPO 同功酶的活性，明显提高小麦面片白度，从而为小麦面粉白度的改良、品质育种提供了
材料。
关键词：小麦；多酚氧化酶（PPO）；RNAi；白度
Down-Regulation of the Expression of Grain ppo Genes to
Improve Wheat Dough Whiteness by RNA Interfere
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