动脉粥样硬化发病机制及其诊治与干预的基础研究.docVIP

项目名称： 动脉粥样硬化发病机制及其诊治与干预的基础研究 刘德培 中国医学科学院基础医学研究所 2011.1至2015.8 卫生部  申请发明专利，促进开发有自主知识产权的IF）5.0有代表性学术论文60篇，其中IF10的论文15篇，顶级杂志论文2-5篇。  三、研究方案 本课题项目分为六个部分，第一部分开展中国人群AS疾病分子遗传基础;第二部分紧密联系内外环境因素中限制能量饮食和特殊饮食，研究有利和不利因素和机体相互作用在AS发病中的机制;第三部分阐明脂代谢紊乱，尤其是TG和HDL代谢紊乱导致AS的分子机制;第四部分阐述含硫氨基酸家族AS斑块不稳定斑块从不稳定向稳定方向转变的机制探讨防治的有效方法降低心血管疾病发病率和死亡率的途径 第一部分 中国人动脉粥样硬化遗传分子基础 学术思路与技术途径： 1.结合中国人群心肌梗死GWAS和国外人群的研究结果，同时选择炎症、脂代谢以及血压调控通路相关基因，在10000例急性冠脉综合征病例对照样本多种生物GWAS研究中200万个遗传变异信息以及多个代谢通路基因网络，基于通路和遗传网络系统分析SNPs、CNVs和单体型变异信息，采用CART、MARS、MDR、贝叶斯网络、随机森林等数学模型，构建遗传因素及环境危险因素的预测模型，找到检查、定量临床疾病亚型的干预靶点，监测疾病进展，确定高危患者，最终实现定量风险评估和个性化早期预警。 可行性分析： 目前收集了高质量的20000例冠状动脉综合征、冠心病和心肌梗死的病例对照资料，为开展大规模重复验证奠定了基础。完成了30余个基因与冠心病和脑卒中的关联和功能研究，发现了数个在国人冠心病和脑卒中发病中具有重要作用的SNPs及单体型。已经应用Affymetrix 500K芯片完成了1500例心梗病例对照的全基因组关联研究，在此基础上进行了imputation，获得200万个遗传变异信息，并发现一系列显著关联位点和区域。应用CART和MARS模型开展了相关代谢通路中11个候选基因的33个SNPs，发现SNP位点间的交互作用在高血压发生中具有重要作用（Hypertension 200647：1147-54）。） 对比 分析 研究创新性： 高甘油三酯血症可通过氧化应激导致AS形成；证明清道夫受体A的胞浆域在AS发生中起关键作用；发现HDL具有调节内皮细胞环氧化酶1的新功能。应用系统生物学手段对这些新发现进行从分子、细胞到整体水平进行深入探索，从而提出新的假说和理论。 可行性分析： 围绕本课题的设置，已经建立了多项实验技术，并取得了较多相关的预实验结果，包括：1)发现了富含TG脂蛋白携带大量的脂质过氧化产物，并通过氧化应激反应引起内皮细胞的活化，有可能成为AS形成的始动因素；2)通过对巨噬细胞中的清道夫受体SRA1胞浆域的相互作用研究，发现了具有结合胞浆域功能并干扰氧化LDL内吞作用的基因GRP78。据此合成的多肽H11可以减少巨噬细胞中脂质的沉积。3)通过对化合物库的筛选，发现了一种化合物GYY4137可显著减少ApoE基因敲除小鼠的AS面积，并改善主动脉舒张功能；对血浆胆固醇和HDL没有影响却可降低TG水平。4)糖尿病患者的HDL能显著增加内皮细胞环氧化酶2（COX2）表达，促进了PGI2 的释放，表现为对AS的代偿性保护作用。5)构建了新的具有HDL受体功能的ATP合酶腺病毒载体，将应用于已知HDL载体SRB1基因敲除小鼠研究，从而发现HDL功能异常的新机制。6）在前期工作中，已经解决了技术难题，成功制备了高TG的ApoCIII转基因小鼠、家兔和小型猪。 第四部分 含硫氨基酸家族在动脉粥样硬化发生中的炎症和免疫调节作用及分子机制 学术思路与技术途径： 本课题采用系统生物医学的观念和手段，特别采用功能蛋白质组学分析的方法，以血管细胞和管周脂肪细胞及免疫细胞（巨噬细胞， T细胞， 树突状细胞）为对象，探讨关键炎性因子的主要来源及其受含硫氨基酸家族家族家族成员间的动态平衡关系效应间的“网络”调节的发病从内源性含硫氨基酸家族Hcy与H2S及其主要代谢酶在AS发生、发展中的作用的精良的研究队伍；本课题组已经在国内建立了很好的学科交叉和优势互补合作研究，包括在蛋白质组学和系统生物学以及分子病理生理学和临床研究的优秀团队，用新的思维和新的研究模式对内源性含硫氨基酸家族ApoE-/-背景下过表达促进斑块不稳定的基因并评价其作用。 2.利用构建的斑块不稳定动物模型，研究免疫炎症和氧化应激对于斑块不稳定性的影响及其分子机制。 3.同时研究调节血管内皮细胞凋亡的关键因子斑块不稳定性的信