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* * 1．掌握毛细管电泳法的基本原理、结构与使用方法。 2．掌握紫外吸收光谱检测方法。 3．测定阿司匹林与水杨酸。 实验二十一 毛细管电泳法测定水杨酸的含量 实验目的 毛细管电泳又称高效毛细管电泳( High Performance Capillary Electrophoresis, HPCE) 是一种仪器分析方法。通过施加10-40kV的高电压于充有缓冲液的极细毛细管，对液体中离子或荷电粒子进行高效、快速的分离。现在，HPCE已广泛应用于氨基酸、蛋白质、多肽、低聚核苷酸、DNA等生物分子分离分析，药物分析，临床分析，无机离子分析，有机分子分析，糖和低聚糖分析及高聚物和粒子的分离分析。人类基因组工程中DNA的分离是用毛细管电泳仪进行的。 实验原理 仪器与试剂 高效毛细管电泳仪；石英毛细管柱50cm×50μm；色谱工作站；PHS-3C数字酸度计 ；离心机 ；超纯水仪器A10 水杨酸（SA）、北四硼酸钠、氢氧化钠、十二烷基硫酸钠（SDS）等试剂均为高纯试剂； 1．电泳条件 毛细管柱在使用前分别用0.1 mol的NaOH溶液和二次蒸馏水及缓冲液冲洗3min后，在运行电压下平衡10min。以后每次进样前均用缓冲液冲柱，在运行电压下平衡5min。 本实验采用电迁移进样（10Kv、5s）。 高压端进样， 低压端检测，20 Kv的工作电压。检测波长为214nm。 2．水杨酸标准样品的测定 分别测定0.05、0.01、0.8、1.2、1.6、2.0和5.0 mmol的水杨酸标准溶液。每个浓度平行测三次。 实验步骤 3．阿司匹林药片中水杨酸含量的测定 a．取阿司匹林药品溶液，在上述的电泳条件下对样品溶液进行测定，平行测三次。 b．把一定浓度的水杨酸加入样品溶液中，进行测定。 4．数据采集 打开色谱工作站软件。把电压上升到20Kv，立即点击主界面的绿色图标—谱图采集，开始谱图采集。在进样之前把屏幕调到色谱工作站的主界面。点击主界面的红色图标—手动停止，可以停止谱图采集。然后将文件起名并保存在指定的文件夹。
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