不同H9N2 亚型禽流感病毒分离株致病力研究及HA 抗原性变异分析.pdfVIP

中国农业科学 2011,44(24):5100-5107 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2011.24.016 不同H9N2 亚型禽流感病毒分离株致病力研究 及HA 抗原性变异分析 陈 陆，刘守川，赵 军，王川庆，王泽霖 （河南农业大学禽病研究所，郑州450002 ） 摘要：【目的】了解近年来中国H9N2 亚型禽流感病毒毒力变化和抗原性变异的特点，【方法】对分离于1998 —2008 年间的25 株H9N2 亚型禽流感病毒分离株进行了EID 、ELD 、MDT、ICPI、IVPI和8 周龄SPF鸡人工感染排 50 50 毒试验，测定了部分分离株与抗H9N2 亚型禽流感病毒Hp参考株HA蛋白单抗2A4 和F6 的血凝抑制（HI）和中和反应 特性，对具有不同反应特性分离株的HA基因进行了序列分析。【结果】不同分离株呈现致病力差异，具多态性特征， 3#、12#和 14#分离株致病力偏强，能引起部分SPF鸡发病和死亡，人工感染8 周龄SPF鸡排毒时间更早，排毒期更 长。3#和 12#分离株与单抗2A4 和F6 呈现特殊的反应特性，单抗不能抑制3#和 12#的血凝特性，也不能中和病毒 感染CEF细胞。HA蛋白氨基酸序列分析表明，3#和 12#分离株 145 位氨基酸发生漂变（S→N），导致与单抗的血凝 抑制反应特性丢失，说明该位点（S145）为H9N2 亚型禽流感病毒HA蛋白的一个抗原表位，是血凝抑制抗体结合位 点。S145N的漂变导致在145—147 位氨基酸多出一个糖基化位点NGT，可能是分离株毒力增强的原因。【结论】本 研究结果表明，H9N2 亚型禽流感病毒呈现变异趋势，出现了有致病力和抗原性变异流行毒株。S145 为H9N2 亚型 禽流感病毒HA蛋白的一个抗原表位，但有该位点漂变导致的抗原变异毒株出现，并可逃避免疫作用，对该病的防 控提出了新的挑战。 关键词：禽流感病毒；H9N2 亚型；HA 蛋白；致病力；抗原变异 Characteristics of Pathogenic and HA Antigenic Variation of H9N2 Subtybe Avian Influenza Viruses Isolated from 1998 to 2008 in China CHEN Lu, LIU Shou-chuan, ZHAO Jun, WANG Chuan-qing, WANG Zhe-lin (Institute of Poultry Disease, Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002) Abstract: 【Objective 】 The objective of this experiment is to investigate the characteristics of pathogenic and antigenic variation of H9N2 subtybe avian influenza viruses isolated from 1998 to 2008 in China. 【Method 】The EID50 , ELD50 , MDT, ICPI, IVPI and the duration of shedding virus from infected 8-week-old SPF chickens of different H9N2 avian influenza viruses isolates were determined. The HI and VN activity of monoclonal antibody 2A4 and