沉默整合素连接激酶基因抑制TCA8113 舌癌细胞生长和侵袭.docVIP

１５５２  第 ３５卷第 １５期 ２０１３年 ８月 １５日  　　　　　　　　　　  第　三　军　医　大　学　学　报 Ｊ　Ｔｈｉｄ　Ｍｉ　Ｍｅｄ　Ｕｎｉ  　　　　　　　　　　  Ｖｏｌ ３５，Ｎｏ．１５ Ａｕｇ．１５　２０１３  论著  文章编号 １０００４０４（２０１３）１５５５２６  沉默整合素连接激酶基因抑制 ＴＣＡ８１１３舌癌细胞生长和侵袭 幸　宇１，２，邓世雄１，陈俊霞２　　（４０００１６重庆，重庆医科大学基础医学院：法医生物信息学研究室１，细胞生物学及遗传学教 研室，分子医学与肿瘤研究中心２） 　　［摘要］　目的　研究沉默整合素连接激酶 （ｉｔｇｒｎｉｋｅｄｋｉａｓ，ＩＫ）基因表达，对人舌鳞癌细胞生长、侵袭和转移 能力的影响。方法 　通过用 ＩＫｍＲＮＡ的特异性 ｓＲＮＡ表达载体和无同源性的对照载体，在脂质体介导下稳定转染人舌 鳞癌 ＴＣＡ８１１３细胞，分为 ＴＣＡ８１１３组、ＴＣＡ８１１３ｖｅｃｔｒ组 和 ＴＣＡ８１１３ｓＩＫ组，通 过 筛 选 鉴 定 后，用 ＭＴＴ法、划 痕 试 验 和 Ｔｒｎｓｅｌ法分别检测细胞生长、迁移和侵袭能力，用 Ｗｅｓｅｒ ｂｌｔ分析细胞中 ＩＫ、ｐｋｔｐＳＫ３β及 Ｓｎａｉ等的表达。结果 　沉默 ＩＫ基因表达显著抑制了细胞的生长、迁移和侵袭能力，接种的第 ４８７２９６１２０小时，ＴＣＡ８１１３ｓＩＫ组的抑制率 分别为 １７％ ２９％ ２５％ ４２％，迁移能力较 ＴＣＡ８１１３组和 ＴＣＡ８１１３ｖｅｃｔｒ组分别下降 ６７％和 ６６％，侵袭能力则较两个对 照组下降了 ６７％ 和 ６８％，ｐｋｔｐＳＫ３β及 Ｓｎａｉ的 表 达 较 ＴＣＡ８１１３组 和 ＴＣＡ８１１３ｖｅｃｔｒ组 分 别 降 低 了 ４５％ 和 ５３％， ５７％和 ６１％ ７４％和 ７３％。结论　 抑制 ＩＫ基因的表达可通过 Ａｋｔ／ＳＫ３β／ｎａｉ途径，显著抑制人舌鳞癌 ＴＣＡ８１１３细胞 的生长、迁移和侵袭潜能，可作为治疗人舌鳞癌的靶蛋白。 　　［关键词］　 整合素连接激酶；人舌鳞癌细胞；肿瘤生长；转移；侵袭 　　［中图法分类号］　Ｒ３９４．３；Ｒ７３７；Ｒ７３９．８６　　 ［文献标志码］　Ａ  Ｓｉｅｎｃｉｇｉｔｇｒｉｉｋｅｄ ｋｉａｓ ｉｈｉｉｓｇｒｏｗｔ ａｎｄ ｍｅｔｓａｓｓｉ ｈｕｍａｎ ｔｎｇｕｅ ｃａｎｃｅｒＴＣＡ８１１３ｃｅｌｓ ＸｉｇＹｕ，，ＤｅｎｇＳｈｉｉｎｇ，ＣｈｅｎＪｎｘｉ２（ＬａｂｏｒａｔｒｙｏｆＦｏｒｅｎｓｉＭｅｄｉｉｅａｎｄＢｉｍｅｄｉａｌＩｎｆｒｍａｔｏｎ，２ＤｅｐａｒｔｅｎｔｏｆＣｅｌＢｉｌｇｙ ａｎｄＧｅｎｅｔｃｓ ＣｅｎｔｒｏｆＭｏｌｃｕｌｒＭｅｄｉｉｅａｎｄＣａｎｃｅｒＲｅｓａｒｈ，ＣｏｌａｇｅｏｆＢａｓｃＭｅｄｉａｌＳｃｉｎｃｅｓ ＣｈｏｎｇｑｉｇＭｅｄｉａｌＵｎｉｅｒｉｙ Ｃｈｏｎｇｑｉｇ ４０００１６，Ｃｈｉａ 　　［Ａｂｓｒａｃｔ］　 Ｏｂｊｃｔｖｅ　 Ｔｏｉｖｅｓｉａｔ ｔｅｅｆｅｃｔｏｆｓｌｎｃｉｇｉｔｇｒｎｉｋｅｄｋｉａｓ （ＩＫ）ｏｎｔｅ ｐｒｌｆｒｔｏｎ，ｍｉｒｔｏｎａｎｄｉｖａｓｏｎｏｆｈｕｍａｎｔｎｇｕｅｓｕａｍｏｕｓｃａｎｃｅｒＴＣＡ８１１３ｃｅｌｓ．Ｍｅｔｏｄｓ　 ＩＫｓＲＮＡ ｅｘｐｒｓｉｎｐｌｓ ｉ ａｎｄａｎｏｎｏｍｏｌｇｏｕｓｖｅｃｔｒ（ｎｅｇａｔｖｅｃｏｎｔｏｌ ｗｅｒ ｔａｎｓｅｒｅｄｉｔ ＴＣＡ８１１３ ｃｅｌｓ ｒｓｅｃｔｖｅｌ．Ｔｈｅｎｔｅｔａｎｓｅｃｔｄｃｅｌｓｗｅｒ ｓｒｅｎｅｄａｎｄｉｅｎｔｆｅｄ．ＭＴＴａｓａｙ ｗｏｕｎｄｈｅａｌｎｇｅｘｐｅｒｍｅｎｔ ａｎｄｔａｎｓｅｌａｓａｙｗｅｒ ｅｍｐｌｙｅｄｔ ｍｅａｓｒ ｃｅｌｐｒｌｆｒｔｏｎ，ｍｉｒｔｏｎａｎｄｉｖａｓｏｎ．Ｔｈｅｅｘｐｒｓｉｎｏｆ ｐｋｔ ｐＳＫ３βａｎｄＳｎａｉｗａｓｄｅｔｃｔｄｂｙＷｅｓｅｒ ｂｌｔｉｇ．Ｒｅｓｕｌ　 ＩｈｉｉｉｎｏｆＩＫｅｘｐｒｓｉｎｏｂｖｉｕｓｙ ｓｐｐｒｓｅｄＴＣＡ８１１３ｃｅｌｐｒｌｆｒｔｏｎ，ｍｉｒｔｏｎａｎｄｉｖａｓｏｎ，ａｓｗｅｌａｓｄｏｗｎｅｇｕｌｔｄｔｅｅｘｐｒｓｉｎｏｆ ｐｋｔ ｐＳＫ３βａｎｄＳｎａｉ．Ｔｈｅｉｈｉｉｏｒ ｒｔｓａｔ４８，７２，９６ａｎｄ１２０ｈｗｅｒ１７％，２９％，２５％ ａｎｄ４２％ ｉ ＴＣＡ８１１３ｓＩＫｇｒｕｐ，ｒｓｅｃｔｖｅｌ．Ｔｈｅｍｉｒｔｏｎｃａｐａｃｉｙｗａｓｄｅｃｒａｓｄｂｙ６７％ ａｎｄ６６％ ｃｏｍｐａｒｄｗｉｈ ｔｅｏｔｅｒｔｏｃｏｎｔｏｌｇｒｕｐｓ．Ｔｈｅｉｖａｓｏｎｃａｐａｃｉｙｗａｓｄｅｃｒａｓｄｂｙ６７％ ａｎｄ６８％ ｃｏｍｐａｒｄｗｉｈｔｅｏｔｅｒ ｔｏｃｏｎｔｏｌｇｒｕｐｓ．Ｔｈｅｅｘｐｒｓｉｎｏｆｐｋｔ ｐＳＫ３βａｎｄＳｎａｉｗａｓｄ