药物分析课件第10章B-甾体激素类药物的分析.pptVIP

* * （三）有机溶剂残留量的检查 （灵敏度法） 甲醇 不得出峰 检测限= 3.1ng 丙酮 ≤5.0% 内标法 + 校正因子 以地塞米松磷酸钠为例 GC法 地塞米松磷酸钠 检查 甲醇和丙酮 精密称取本品0.16g，置10ml量瓶 中，精密加内标溶液2ml，加水稀释至 刻度，作为供试液；另精密量取甲醇10 μl(≈7.9mg)与丙酮100μl(≈79mg)置 100ml量瓶中，精密加内标溶液20ml， 加水至刻度，作为对照液。照气相色谱 法测定，含丙酮不得过5.0%，并不得 出现甲醇峰。 （二）游离磷酸盐的检查 地塞米松磷酸钠 对照品比色法 供试液+钼酸铵+1-氨基-2-萘酚-4-磺酸 钼蓝：740nm 对照液：同上 （对照液 0.0035%KH2PO4） 返 回 （一）HPLC法 USP、BP、JP均采用 RP－HPLC（大多内标法） （甾体激素类药物常含有结构相似的其他甾体杂质，对利用结构特征设计的比色法有干扰） 四、含量测定 测定对象： 甾体激素类药物的原料和制剂。 示例：黄体酮的含量测定色谱条件：固定相 ODS，流动相 甲醇-水 （65:35），检测波长254nm， 内标物 己烯雌酚 系统适用性试验：n 1000，R符合规定。 测定样品：黄体酮原料、注射液。定量方法：内标法 （二）UV法 △４-3-酮 240nm（±） 肾上腺皮质激素 雄性激素和蛋白同化激素 孕激素、口服避孕药 苯环 280nm（±） 雌激素 示例：醋酸地塞米松片的含量测定 （1）配制供试液（2）测定：240nm（3）计算 肾上腺皮质激素、 雄性激素和蛋白同 化激素、孕激素 C3－酮基 （1） 原理 异烟腙（黄） 酮基 异烟肼 - 3 C HCl （缩合） 1. 异烟肼比色法 （三）比色法 异烟腙（黄色） （2）方法 对照品法 55 ℃ 异烟肼 挥去乙醇 对照液 供试液 A 暗45′ （3）讨论 反应速度（反应专属性） A. C3= O ＞ C17= O 、 C20= O C11= O 不反应 反应专属性 C3－酮基 B. 溶剂的选择 异烟肼盐酸盐→甲醇、乙醇 无水甲醇 无水乙醇 C.水分、温度、O2与光线的影响 含水量↑→腙水解↑→A↓→%↓ 不挥发溶剂、不吸收水分时→ O2与光线无影响 t℃ ↑ → ν↑ D. 酸的种类和浓度及异烟肼的浓度 酸:异烟肼 = 2:1 盐酸浓度0.0074mol/L 异烟肼浓度0.00365mol/L 最大A 肾上腺皮质激素类 C17 -α－醇酮基 强还原性 （1）原理 2. 四氮唑比色法 有色甲瓒 四氮唑盐 醇酮基 - a - 17 C OH - [还原] 三苯甲瓒↓深红 氯化三苯四氮唑 （TTC） 红四氮唑（RT） [H] 蓝四氮唑（BT） （2）方法 对照品法 25 ℃ 氢氧化四甲基铵 对照液 供试液 A TTC 40～45′ 暗 （3）讨论 A. 基团对反应速度的影响 C11= O＞ C11－OH C21－OH＞ C21-酯 B. 溶剂、水分的影响 以无醛乙醇为溶剂 C. O2与光线的影响 避光 隔绝空气、快速、充N2 D. 碱的种类及加入顺序 以氢氧化四甲基铵的结果最佳 加入顺序： 碱试液 四氮唑盐 皮质激素溶液 E. 温度与时间 （1）原理 λmax=465 λmax=515 雌激素 3. Kober反应比色法 △ △ 桃红 黄色 雌激素 2 O H 乙醇 - 4 2 SO H 雌二醇-3-甲醚 λmax=465 λmax=515