山西高原油松种群遗传多样性.docVIP

山西高原油松种群遗传多样性 李 毳1, 2，柴宝峰1，王孟本1* 1. 山西大学黄土高原研究所，山西 太原 030006；2. 山西财经大学环境经济系，山西 太原 030006 摘要：用酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳（A）技术，分析了山西高原9个油松种群在醇溶蛋白水平上的遗传多样性。135份材料共分离出23条带，其中3条为共有带，多态性高达86.95%。全部材料共出现53种带型，9个不同油松种群的带型有差异，同一种群不同个体的带型也有所不同，说明山西高原的油松在遗传上已产生一定程度分化，在醇溶蛋白水平上呈现出遗传多态性。从供试材料的带型计算出油松遗传分化系数为0.1547，即在种群间的变异占总变异的15.47%，种群内变异为84.53%，大部分的遗传变异存在于种群内，但种群间的分化程度在松属树种中也属于较高水平。根据23个多态位点计算遗传相似系数和遗传距离，进行聚类分析，将山西高原9个油松种群聚为3个类群。 关键词：山西高原；油松；醇溶蛋白；遗传多态性；聚类分析 中图分类号：Q948 文献标识码：A 文章编号：1672-2175（2005）05-0719-04油松Pinus tabulaeformis Carr.是我国特有树种，主要分布于暖温带落叶阔叶林区，如山西、山东、河北、河南、陕西、辽宁和内蒙古等省（区）的山地，是我国北方地区分布最广的针叶树种。山西是天然油松林分布面积最大的省份之一，属油松天然分布中心区。在山西高原天然油松林主要集中于太岳林区、关帝林区、中条林区，在太行林区、吕梁林区分布也较多。油松根系发达，适应性强，耐干旱贫瘠，造林易成活，具有保持水土和保护环境的功能，是我国华北及西北荒山绿化和营造生态林的先锋树种。许多学者从油松的形态特征、生态特征、物候及生理、生化指标等方面对油松的遗传结构进行过研究[1, 2]。但在醇溶蛋白水平上对油松种群遗传结构进行研究的尚未见报道。本文采用酸性聚丙稀酰胺凝胶电泳（Acidic Polyacrylamide Gel Electrophoresis, A）技术，在醇溶蛋白水平上对山西高原9个不同油松种群的遗传多样性进行分析，为油松基因资源利用等提供依据。 1 材料与方法 1.1 材料 表1 实验油松种子采集地点 Table 1 Loci of P. tabulaeformis seeds collection 采集地 1 2 3 4 5 6 7 8 9 太岳龙门口 中条中村 吕梁上庄 太行铁桥 黑茶山 太岳灵空山 吕梁克城 芦芽山 关帝三道川 经度 113(20′ 110(59′ 110(18′ 113(20′ 111(15′ 112(17′ 110(18′ 111(59′ 112(02′ 纬度 36(15′ 35(34′ 36(33′ 37(26′ 38(12′ 36(40′ 36(33′ 38(40′ 37(25′ 本实验所用的9个油松种群的种子来源及编号见表1，种子在实验室自然风干之后密封，置4 ℃冰箱保存备用。 1.2 研究方法 1.2.1 样品提取 每个种群分别取15粒种子，浸种24 h，剥取胚乳。直接放入1.5 m Eppendorf管中1 mg加15 (L的比例加入样品提取液（Ψ/%，2-氯乙醇：20，2—巯基乙醇：1；w/%尿素：12，甲基绿：0.05），充分研磨、混匀，室温浸提过夜。12000 r/min离心10 min，取上清液备用。5.38，甲叉双丙烯酰胺：0.62，尿素：6.0，抗坏血酸：0.1，硫酸亚铁：0.005），加入4μL w=10%过硫酸铵和40 μL TEMED，匀槽加1μL样品，恒压200 V，电泳。染色和照相用1 g考马斯亮蓝R-250，225 mL甲醇，225 mL ddH2O，50 m冰乙酸配制的染色液染色过夜。用甲醇50 mL，ddH2O 400 mL，冰乙酸50 mL配制的脱色液脱色IV区（如图1）。由图中可以看出，I区谱带较细、 表2 各油松种群间的遗传相似度和遗传距离1) Table 2 Neis original measures of genetic identity and distance 种群 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 **** 0.9833 0.9570 0.9849 0.9472 0.9935 0.9417 0.9512 0.9533 2 0.0169 **** 0.9574 0.9627 0.9729 0.9821 0.9692 0.9558 0.9604 3 0.0440 0.0436 **** 0.9423 0.9418 0.9520 0.8972 0.9730 0.9803 4 0.0153 0.0380 0.0595 **** 0