金黄色葡萄球菌nuc基因特异性核酸探针的制备及应用.pdfVIP

金黄色葡萄球菌nuc基因特异性核酸探针的制备及应用.pdf

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2004 年 10 月 中国比较医学杂志 October , 2004 第 14 卷 第 5 期 CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE Vol. 14  No. 5 技术方法 金黄色葡萄球菌 nuc 基因特异性核酸探针 的制备及应用 1 2 1 高正琴 ,李厚达 ,贺争鸣 ( 1 中国药品生物制品检定所 ,北京  100050 ;2 扬州大学 ,扬州  225009)   【摘要】 目的  建立核酸探针检测实验动物金黄色葡萄球菌的方法。方法  将重组质粒 pGEMNUC 中金黄 色葡萄球菌 nuc 基因特异性片段酶切回收 ,经生物素标记后作为核酸斑点杂交试验探针 ,对细菌菌株及临床样品 进行了检测。结果  核酸探针与金黄色葡萄球菌 DNA 呈杂交阳性 ,而与表皮葡萄球菌、化脓性链球菌、大肠埃希 菌等其他细菌 DNA 呈杂交阴性 ,斑点杂交检测的灵敏度为 1pg 基因组 DNA 。用斑点杂交试验和 PCR 对 322 份 SPF ( ) 小鼠的临床样品进行了检测 ,检出率为 31 % 10/ 322 ,符合率为 100 % ,与细菌学检查的结果相一致。结论  建立 的DNA 探针检测金黄色葡萄球菌方法具有高度的特异性和敏感性 ,且较快速 ,可用于实验动物金黄色葡萄球菌的 监测。 【关键词】 葡萄球菌 ,金黄色 ;基因 nuc ;DNA 探针 ( ) 【中图分类号】Q523   【文献标识码】B   【文章编号 2004 Study on Application of DNA Probe for Detecting Staphylococcus aureus in Laboratory Animals 1 2 1 GAO Zheng- qin , LI Hou- da , HE Zheng-ming ( 1. National Institute for the Control of Pharmaceutical and Biological Products , Beijing 100050 , China ; 2Yangzhou University , Yangzhou  225009 , China) 【Abstract 】 Objective  To establish a sensitive and specific molecular biologi

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