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PoraPak Rxn CX 分离强极性碱性化合物的研究分离强极性碱性化合物的研究 分离强极性碱性化合物的研究分离强极性碱性化合物的研究 周迎春 康龙化成 （北京）新药技术有限公司 我们采用沃特世公司 PoraPak Rxn CX 6cc/400mg 小柱对含有目标化合物的合成反应混 和溶液 （总体积约为5 mL，质量约 300 mg ）进行纯化，其中目标化合物为强极性碱性化合 物，分子量为 317 。 实验过程实验过程：： 实验过程实验过程：： 1、 用LC/PDA/MS 对合成反应混和液进行分析，经过MS 确证，保留时间为0.552 和0.685min 的峰为目标化合物 （部分成盐）；利用面积归一化法计算，目标化合物的纯度约为 30 ： 色谱条件 （如下的分析采用同样的色谱条件）： 流动相 A: 0.1%甲酸水溶液 流动相 B: 乙腈 梯度方法：3 min 由5% B升至 100 B%，保持 100％B 1 min 流速：1.5ml/min 色谱柱：Waters XBridge C18 5u,4.6*50mm 检测器：二极管阵列检测器串联单四极质谱检测器，提取254nm 光谱数据 2 、 用 PoraPak Rxn CX 6cc/400mg 小柱进行纯化，具体步骤如下： 小柱润湿活化小柱润湿活化 小柱润湿活化小柱润湿活化 10 mL 甲醇 上样步骤上样步骤 上样步骤上样步骤 将 5 mL 反应液倒入小柱中 冲洗步骤冲洗步骤 冲洗步骤冲洗步骤 10mL 甲醇 洗脱步骤洗脱步骤 洗脱步骤洗脱步骤 10mL 5% 氨水甲醇溶液 3、 用 LC/PDA/MS 对冲洗步骤收集到的流出液进行分析，得到如下色谱图： 从色谱图中可以看出大部分杂质被冲洗下来，而产物得以保留在小柱上。 4 、 用 LC/PDA/MS 对洗脱步骤收集到的流出液进行分析，得到如下色谱图： 从色谱图中可以看出绝大部分的杂质被去除，0.505 min 和 0.682 min 的峰都为目标产物， 利用面积归一化法计算，目标物纯度超过 95 ；用单四极杆质谱对保留时间为0.505 min 和 0.682 min 的峰进行确证，证明两个峰都是纯的。 实验总结实验总结：： 实验总结实验总结：：