一榄香烯乳逆转人肺癌细胞的实验研究.pdfVIP

维普资讯 }》，-3。／ 肿瘤 防治研究 1996年第 23卷第 5期 · 299 · 、 ／ 7； ‘。I一 榄香烯乳逆转人肺癌细胞的实验研究 钱 军 秦叔逵 杨爱珍 乐美兆 刘文虎 摘 要 体外培养人肺癌细胞经 30~g／ml揽香烯乳作用后，生长受到抑制，H— TdR、：H—uR掺入率明显下降；流式细胞分析发现该药作用 72小时后G。／G1期细胞 比例上升 ，S期 比例下降；光镜 、电镜观察可见药物作用后癌细胞增殖减慢 ，缩小变 圆，被绒毛减少 掳浆比例下降，异染色质增多。由此提示 ，榄香烯乳可在细胞生物 学及形态学水平逆转人肺癌细胞的表型，诱导这些细胞趋于分化 。 诱导分化 榄 作用肺癌细胞 12小时．光镜观察 尚 研制的抗癌新药 。我们 自1994年起在国内率先应用 未见明显的形态学改变 ，而细胞摄取 H—TdR、啊一 榄香烯乳单药治疗 中晚期肺癌 53例 ．有效率达 uR率 已明显减步，表明药物对肺癌细胞 的DNA、 32．07 同时在实验研究中观察到，该药的抗癌 RNA合成已有抑制作用．且随着药物浓度的提高， 机理不同于传统的细胞毒性化疗药 ，与阳性对照药 抑制作用更趋显著 (见表 1、表 2)。 阿霉素(ADM)相比，呈现不同的形态学变化 ，进一 2．2 榄香烯乳作用肺癌细胞后的流式细胞分析 步的研究提示 ，榄香烯乳可在一定程度上对体外啼 揽香烯乳作用 72小时后，细胞增殖能力下降， 癌细胞的表塑起诱导分化作用 。 Go／G 期细胞比倒增多，S期细胞 比侧牖少。经统计 1 材料与方法 学处理 ，与空 白对照组相 比，PI值显著下降(P 1．1 细 帽培养 人肺 腺 癌细 胞 株 Anip-937、 0．05)．(见表 3)。 ． A549、SPC-A 和小细胞肺癌 株 H128、SPC于含 2．3 形态学观察 15 小牛血清的 RPMI一1640培养液 中，37C恒温、 药物作用 72小时后，肺癌细胞超微结构 的主 5％C 、饱和湿度下体讣培养传代 ，培养液内含青 要改变如下： 霉素 loo~／ml，链霉幕 100~g／ml 空 白对照组：光铙下 H128细胞为悬浮型，细 1．2 H-TdR掺人试验 以5×104／ml活细胞致接 胞圆形 ．其余细胞均为贴壁型，上皮佯排列。扫描电 种 96孔培养板．24小时后加入不同浓度 榄香烯 铙观察见细咆成球形，表面完整，有丰富的微绒毛。 乳t2小时后加入 H—TdR(1 i／孔)．共 同培养 lO 透射 电镜观察见细胞成 圆形或多边形 ，胞睦完整。 小时后收集细胞，液闲仪计致每孔 cpm值。 棱大 ，校膜 内陷，有探切迹 ，有的核似分叶状 ，常 1-3 流式细胞木 (FCM) 癌细胞在 30．~g／ml浓度 染色质丰富，异染色质较步。核仁大而明显，常为多 下培养 72小时后 收集细胞 ，于 FACStarPlus流 个 ，SPC—A 、A549细胞可见核仁边集现象，核分裂 式细胞仪分析测定，按下式计算增殖指教(PI)叫。 相可见 。胞浆量少 ，核浆比倒大 ，胞质 中有大量辨离 一 S+G，+M 核糖体及少量细胞器 ，糖原颗粒步～中量，Anlp一 r G— ／GI+S—+G：+M o 937和 SPC—A-细胞有成堆的糖原颗粒 1．4 形态学观察 如方法