细菌感染大鼠血中血小板型磷脂酶A 2 mRNA 水平的变化及其cDNA 克隆.pdfVIP

细菌感染大鼠血中血小板型磷脂酶A mRNA水平 2 的变化及其cDNA克隆 1 2 2 刘滔滔 梁宁生 杨帆 (1.广西医科大学第一附属医院药剂科；2.广西医科大学附属肿瘤医院药理研究室 广西南宁530021) [摘 要] 目的 观察感染大鼠血中血小板型PLA mRNA水平的变化，研究其基因和氨基酸顺序结构的 2 特征。为开发新的抗菌药物提供依据。方法 用半定量RT-PCR方法检测感染大鼠血中PLA mRNA，并对PLA 2 2 cDNA进行克隆和序列分析。结果 大鼠感染细菌后，血中血小板型PLA mRNA水平迅速明显增加，其DNA和氨 2 基酸结构与其它组织来源的PLA 有高度的同源性。结论 细菌感染可引起大鼠血中PLA 在基因水平上的迅速 2 2 反应，这可使血小板型PLA 的生成增加并控制感染。血中克隆出来的PLA cDNA与大鼠其它组织来源的PLA 2 2 2 虽略有不同，但其酶的催化中心及基本结构完全一致。 [关键词]血小板型磷脂酶A2 细菌感染 信使RNA cDNA克隆 基金项目：广西自然科学基金资助项目：(9920012);国家人事部留学回国人员科技资助项目 作者简介：刘滔滔，女，医学硕士，主要从事抗感染药物的研究、开发和应用 血小板型磷脂酶A (phospholipase A - PLA )，也称Ⅱ型PLA ，是源于哺乳类生物的 2 2 2 2 一种小分子PLA2 ，近年的一些实验表明，它有直接杀灭细菌的作用，并有可能发展成一种新 型抗菌药物[1～3]。我们先前的一项研究显示，细菌感染的动物模型血中PLA 活性迅速增加， 2 起杀灭革兰氏阳性细菌的重要作用[4]。本研究的目的是探讨在细菌感染中PLA 在基因水平上 2 的反应，并从血中克隆出PLA2 cDNA，研究其cDNA和氨基酸顺序的特点，增加对血小板型PLA2 分子的认识，为开发新型抗菌药物提供重要信息。 1 材料与方法 1.1实验动物 体重（400±50）g，♂，Wistar大鼠，由广西医科大学实验动物中心提供。 1.2细菌 金黄色葡萄球菌标准菌株（ATCC25923），为中国生物制品检定所提供。 1.3 主要试剂 总 RNA 提取试剂盒为 Promeg