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朝藿定Ｃ对小鼠巨噬细胞的调节和脑缺血/再灌注损伤的保护作用1
中文摘要………………………………………………………………………………………….1
The regulatory effects of EPIc on macrophages in mouse and protective
effects on cerebral ischemia-reperfusion mouse4
Abstract…………………………………… ………………………………………………………4
前言7
一．朝藿定 c 的研究进展7
二．巨噬细胞的概述8
三．脑缺血再灌注的病理生理研究9
四．脑缺血再灌注损伤与免疫系统的关系11
五．课题设计的思想和意义12
参考文献12
第一章EPIc 对小鼠腹腔巨噬细胞的调节作用13
引言13
材料和方法13
1 实验材料13
2 方法17
结果21
1 EPIc对腹腔巨噬细胞药物毒性结果21
1.1 MTT法检测EPIc对腹腔巨噬细胞的药物毒性21
1.2 CCK-8试剂盒检测EPIc对腹腔巨噬细胞的药物毒性作用22
2 EPIc对腹腔巨噬细胞存活的影响22
2.1 倒置显微镜下观察EPIc对腹腔巨噬细胞存活的影响22
2.2 Sytox® Green 染色，荧光酶标仪检测 EPIc 对 CHX、CTX 及 H O 诱导的腹巨
2 2
噬细胞凋亡的影响23
3 EPIc对腹腔巨噬细胞保护作用机制的研究…………………………………………….24
3.1 EPIc对腹腔巨噬细胞线粒体的影响……………………………………………..24
3.2 EPIc对腹腔巨噬细胞溶酶体的作用……………………………………………..25
4 EPIc对腹腔巨噬细胞功能的研究……………………………………………………….26
4.1 EPIc对腹腔巨噬细胞粘附功能的研究…………………………………………..26
4.2 EPIc对腹腔巨噬细胞释放NO 的影响……………………………………………27
4.3 EPIc对腹腔巨噬细胞细胞因子释放的影响……………………………………..28
4.3.1 EPIc对腹腔巨噬细胞IL-1β释放的影响………………………………….28
4.3.2 EPIc对腹腔巨噬细胞IL-6、IL-10 、MCP-1 、IFN-γ及TNF释放的影响..28
4.4 EPIc对腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响…………………………………………..29
4.4.1 激光共聚焦显微镜检测EPIc对E.coli 的吞噬功能的影响………………29
4.4.2 流式细胞仪检测EPIc对腹腔巨噬细胞吞噬荧光微球功能的影响……..30
讨论……………………………………………………………………………………………...31
参考文献………………………………………………………………………………………...37
第二章 EPIc 对小胶质细胞的调节作用38
引言38
材料与方法40
1 材料40
2 方法43
结果46
1 X-Celligence RTCA系统检测EPIc对小胶质细胞长期存活的影响46
2 X-Celligence RTCA系统检测EPIc对H O 诱导的小胶质细胞凋亡的影响46
2 2
3 EPIc对ION引起的胞浆内Ca2+过载导致的小胶质细胞凋亡的影响47
3.1 X-Celligence RTCA系统检测
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