海藻酸钠复合载体长期扩增培养的软骨细胞生物学稳定性.pdfVIP

海藻酸钠复合载体长期扩增培养的软骨细胞生物学稳定性 暨南大学 海藻酸钠复合载体长期扩增培养的软骨细胞生物学稳定性 硕士研究生： 朱振宗 导 师： 梁伟国教授 摘要 背景：近年研究发现在海藻酸钠三维培养体系中软骨细胞存活时间延长，细胞外基质 分泌旺盛。 目的：探讨海藻酸钠复合载体对体外长期快速增殖培养的软骨细胞生物学稳定性的影 响。 方法：将兔软骨细胞接种至以海藻酸钠、透明质酸、壳聚糖、纤维连接蛋白、碱性成 纤维细胞生长因子为主要成分的复合载体三维培养体系中，以平面培养作为对照。定期观 察在两种不同培养体系中软骨细胞形态学改变，细胞生长曲线差异，细胞上清液糖胺多糖 含量差异，软骨细胞中表达Ⅱ型胶原、糖胺多糖的差异。 结果：软骨细胞在海藻酸钠复合载体中生长良好，生长旺盛，并形成球状细胞团，细 胞分裂增殖活跃；培养 2d 时复合载体培养软骨细胞增殖稍高于平面培养软骨细胞；培养 4d 时可见复合载体培养软骨细胞增殖明显加快；培养6～14d 时复合载体培养的仍保持较 稳定增殖，而平面培养的软骨细胞增殖逐渐降低；复合载体细胞外液糖胺多糖含量明显高 于平面培养软骨细胞；复合载体培养的软骨细胞表达糖胺多糖及Ⅱ型胶原的量明显高于平 面培养软骨细胞。 结论:海藻酸钠复合载体可以长期扩殖培养软骨细胞并保持其生物学稳定性。 关键词：海藻酸钠；软骨细胞；培养；载体；生物学稳定性 I 海藻酸钠复合载体长期扩增培养的软骨细胞生物学稳定性 暨南大学 The biological stability of long-term amplification and culture chondrocytes on three-dimensional culture system of multifactorial sodium alginate Abstract Background: Previous studies demonstrated that the survival time of chondrocytes is prolonged in three-dimensional culture system of multifactorial sodium alginate; extracellular matrix has a strong secretion. Objective : To explore the effect of biological stability of long-term amplification culture chondrocytes on three-dimensional culture system of multifactorial sodium alginate. Methods : Chondrocytes were implanted on three-dimensional culture system which comprises sodium alginate, hyaluronic acid, chitosan, fibronectin, and basic fibroblast growth factor （bFGF ）, and the plane cu