我国细粒棘球蚴新疆分离株AgB 亚基基因克隆及序列分析.pdfVIP

·论著 · 我国细粒棘球蚴新疆分离株ＡｇＢ亚基基因 克隆及序列分析 １ ２ １ ３ １ １ １ 高春花 崔刚 汪俊云 王勇　杨癑涛 石锋 朱慧慧 【摘要】　目的　对我国细粒棘球蚴新疆分离株ＡｇＢ亚基基因进行克隆、测序，对序列进行遗传变 异性分析。方法　根据参考文献设计特异性引物，从新疆源细粒棘球蚴（Ｅｃｈｉｎｏｃｏｃｃｕｓｇｒａｎｕｌｏｓｕｓ，Ｅｇ）原 头节中提取总ＲＮＡ，通过ＲＴＰＣＲ扩增目的基因片段并克隆入ＴＡ载体中测序。用Ｂｉｏｅｄｉｔ分析软件和 Ｂｌａｓｔｎ和ｃｌｕｓｔｅｒＷ２等在线分析系统对序列进行分析。结果　从细粒棘球蚴中克隆获得ＡｇＢ抗原的３ 个亚单位基因，经测序确定为正确的目的序列；序列比对分析表明，３个亚单位基因的核苷酸序列一致 性为４３％～６０％，氨基酸序列一致性为３０％～４２％。结论　ＥｇＡｇＢ的亚单位基因变异性较大。 【关键词】　细粒棘球蚴；ＡｇＢ亚基；基因克隆；序列分析 ＣｌｏｎｉｎｇａｎｄｓｅｑｕｅｎｃｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅａｎｔｉｇｅｎＢｓｕｂｕｎｉｔｓｆｒｏｍＥｃｈｉｎｏｃｏｃｃｕｓｇｒａｎｕｌｏｓｕｓｉｓｏｌａｔｅｆｒｏｍ １ ２ １ ３ １ Ｘｉｎｊｉａｎｇ，Ｃｈｉｎａ　ＧＡＯＣｈｕｎｈｕａ，ＣＵＩＧａｎｇ，ＷＡＮＧＪｕｎｙｕｎ，ＷＡＮＧＹｏｎｇ，ＹＡＮＧＹｕｅｔａｏ，ＳＨＩ １ １ １ Ｆｅｎｇ，ＺＨＵＨｕｉｈｕｉ．　 ＮａｔｉｏｎａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＰａｒａｓｉｔｉｃＤｉｓｅａｓｅｓ，ＣｈｉｎｅｓｅＣｅｎｔｅｒｆｏｒＤｉｓｅａｓｅＣｏｎｔｒｏｌａｎｄ Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ，ＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＰａｒａｓｉｔｅａｎｄＶｅｃｔｏｒＢｉｏｌｏｇｙ，ＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＰｕｂｌｉｃＨｅａｌｔｈ，ＷＨＯＣｏｌｌａｂｏｒａｔｉｎｇＣｅｎｔｒｅｆｏｒ ２ Ｍａｌａｒｉａ，ＳｃｈｉｓｔｏｓｏｍｉａｓｉｓａｎｄＦｉｌａｒｉａｓｉｓ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０００２５，Ｃｈｉｎａ　 ＫｉｚｉｌｓｕＫｉｒｇｉｚＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＥｎｄｅｍｉｃＤｉｓｅａｓｅ ３ Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ，Ａｔｕｓｈｉ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ，８４５３５０，Ｃｈｉｎａ　 ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，Ｗａｙｎｅ ＳｔａｔｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＳｃｈｏｏｌｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｄｅｔｒｏｉｔ，Ｍｉｃｈｉｇａｎ４８２０１，ＵＳＡ Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ：ＷＡＮＧＪｕｎｙｕｎ，Ｅｍａｉｌ：ｗａｎｇ＿ｊｕｎｙｕｎ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ ＳｕｐｐｏｒｔｅｄｂｙｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＭａｊｏｒＰｒｏｇｒａｍ（２００８ＺＸ１０００４０１１，２００９ＺＸ１０００４３０２） ａｎｄｔｈｅＢｕｒｅａｕｏｆＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ｔｈｅＸｉｎｊｉａｎｇＵｙｇｕｒＡｕｔｏｎｏｍｏｕｓＲｅｇｉｏｎ，Ｃｈｉｎａ（２００８９１１３０） 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　ＴｏｃｌｏｎｅｔｈｅｓｕｂｕｎｉｔｓｏｆＡｇＢａｎｔｉｇｅｎｇｅｎｅｆａｍｉｌｙｏｆＥｃｈｉｎｏｃｏｃｃｕｓｇｒａｎｕｌｏｓｕｓ （Ｅｇ），ａｎａｌｙｚｅｇｅｎｅｔｉｃｖａｒｉａｂｉｌｉｔｙｏｆｔｈｅｇｅｎｅｓｅｑｕｅｎｃｅｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｓｐｅｃｉｆｉｃｐｒｉｍｅｒｓｗｅｒｅｄｅｓｉｇｎｅｄｂａｓｅｄｏｎ ｔｈｅｐｕｂｌｉｓｈｅｄｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ．ＴｏｔａｌＲＮＡｗａｓｅｘｔｒａｃｔｅｄｆｒｏｍＥ．ｇｒａｎｕｌｏｓｕｓｐｒｏｔｏｓｃｏｌｅｃｅｓｃｏｌｌｅｃｔｅｄｆｒｏｍａｓｈｅｅｐ ｈｙｄａｔｉｄｃｙｓｔｆｒｏｍＸｉｎｊｉａｎｇ，ｔｈｅｆｒａｇｍｅｎｔｓｏｆｔｈｒｅｅＡｇＢｓｕｂｕｎｉｔｓｇｅｎｅｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄｂｙＲＴＰＣＲｕｓｉｎｇｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｅｄＲＮＡａｎｄｃｌｏｎｅｄｉｎｔｏＴＡｖｅｃｔｏｒｆｏｒｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ．