四君子汤防治D-半乳糖诱致小鼠脑衰老作用的实验研究.docVIP

英 文 缩 略 词 表 英文缩写 英 文 全 称 中 文 全 称 [Ca2+] i Internal concentration of Ca2+ 细胞内Ca2+浓度 D-gal D-galactose D-半乳糖 2,6-DPIP 2,6-dichlorophenol-indophenol sodium 2,6-二氯苯酚靛酚钠 DMSO Dimethyl Sulphoxide 二甲基亚砜 DMCs Multi-functional carbonyls 含有两个或多个功能基团的羰基化合物 FADH Flavin adenine dinucleotide,reduced 还原型黄素腺嘌呤二核苷酸 GSH-Px Glutathione peroxidase 谷光甘肽过氧化物酶 mtDNA Mitochondrial DNA 线粒体DNA NO Nitric oxide 一氧化氮 NOS Nitric oxide synthase 一氧化氮合酶 ·O-2 Superoxide radical 超氧阴离子 ·OH Hydroxyl radical 羟自由基 PUFA Polyunsaturated fatty acids 多不饱和脂肪酸 PCR Polymerase chain reaction 聚合酶链式反应 PBS Phosphate-buffered saline 磷酸盐缓冲液 PI Peoidium iodide 碘化丙啶 ROS Reactive oxygen species 活性氧 SJZ Decoction of Four Mild Drugs 四君子汤 SDH Succinate dehydrogenase 琥珀酸脱氢酶 中文摘要 目的：观察四君子汤(Sijunzi Decoction, SJZ)对D-半乳糖诱致小鼠学习记忆障碍的改善作用，并探讨其改善作用与脑内抗氧化和线粒体功能结构的关系。 方法：昆明种小鼠120只，雌雄各半，采用D-半乳糖(1000mg·kg-1·d-1)皮下(sc)注射，建立小鼠脑衰老模型。小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、维生素E(250mg·kg-1)组、SJZ(20g·kg-1、10g·kg-1、5g·kg-1)(20g·kg-1、10g·kg-1、5g·kg-1)6w。采用水迷宫测试小鼠学习记忆能力；采用比色法测定脑组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和琥珀酸脱氢酶(SDH)的活力；采用比色法测定一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NOS)的活性；采用荧光分光光度计检测小鼠脑海马神经细胞内钙离子浓度；采用PCR方法检测小鼠海马细胞mtDNA缺失突变；采用透射电镜方法观察小鼠脑海马线粒体形态结构的改变。 结果： (1) SJZ 高、中、低剂量均能明显改善模型小鼠的学习与记忆，表现为减少学习错误次数(P0.01或P0.05)，增强记忆持续时间(P0.01或P0.05)；(2) SJZ 高、中、低剂量均能提高脑组织GSH-PX和SDH的活力，同时降低NO含量和NOS活性，降低脑海马细胞内钙离子浓度，其中高、中剂量尤明显(P0.01)。(3) SJZ 高、中、低剂量防止小鼠脑海马神经细胞mtDNA缺失突变，改善海马神经细胞内线粒体的超微结构。 结论： SJZ具有改善D-半乳糖诱致脑衰老模型小鼠的学习和记忆能力，改善衰老模型小鼠海马线粒体的超微结构，其作用可能与SJZ提高脑组织的抗氧化能力，调节细胞内钙离子水平，和减少脑组织mtDNA片断缺失有关。 关键词：四君子汤；D-半乳糖；学习记忆；脑衰老；线粒体DNA；细胞内钙；GSH-Px；SDH；NO；NOS；超微结构 ABSTRACT Objective: To observe the improving effects of Sijunzi Decoction (SJZ) against disturbance of the learning and memory in mice induced by D-galactose, and to study the relationship of these effects with antioxidative activity and structure and function of mtDNA. Methods: There were 120 Kunming mice, female or male were half of it in this experiment. After subcutaneous inject D-galactose (1000mg·kg-1·d-1) for 8 wee