用于细胞破裂的微流控生物芯片的研制.pdfVIP

第23 卷 分析化学 （I)JK DL*JL ）! 仪器装置与实验技术 第 期 ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! +##, 年 月 6F;EAE M/?8;79 /N *;79O=FG79 6EFA=8O ,4, P ,,# !!!!!!!!!!!!! ! ! 仪器装置与实验技术 ! ! !!!!!!!!!!!!! 用于细胞破裂的微流控生物芯片的研制 # 陈兴! 崔大付 ! 刘长春! 蔡浩原 （中国科学院电子学研究所，传感技术国家重点实验室，北京###$# ） 摘! 要! 基于微电子机械系统（%%’ ）技术，研制成一种夹流式血细胞破裂微流控生物芯片。细胞样品在破 胞试剂夹流作用下导入芯片并在微沟道中流动，两种液体在流动过程中充分混合，导致细胞破裂。采用抗凝 全血为细胞样品，比较胍盐和曲拉通的破胞效果；并分析在胍盐破裂细胞条件下，细胞浓度和流速对破胞效果 的影响。控制破胞试剂流速远大于样品流速，可在几秒钟内完成细胞的破裂；保持破胞试剂与样品流速的比 例，同时提高流速可在芯片上实现细胞的快速破裂。夹流式细胞破裂芯片具有与细胞分离芯片和脱氧核糖核 酸（()* ）提取芯片相集成的潜力，可实现对复杂生物样品预处理操作，为实现微全分析系统打下良好基础。 关键词! 微电子机械系统，微流控，生物芯片，细胞破裂 ! 引 言 随着%%’ 技术与分子生物学、分析化学、生物医学等学科的交叉深入研究，微全分析系统 （5*’ ）已成为国际上研究的前沿和热点。 5*’ 是高度集成化的集样品预处理、基因扩增等微流体生 ! ! ［，+ ］ ［2 ，3 ］ 化反应和分离检测分析为一体的便携式生化分析系统。基因扩增芯片 、毛细管电泳芯片 的研究 较多，而样品预处理芯片的研究较少。生物样品是复杂的混合物，需分离提纯生物大分子，分离提纯效 果将直接影响生化反应和生化分析的结果。因此，样品预处理芯片的研究已成为实现 5*’ 的关键和 ! 难点。以核酸分子为例，预处理过程包括细胞分离、破胞、脱蛋白、提纯核酸等多步工作。 不同生物体或同一生物体的不同组织细胞破碎的难易不同，使用的方法也不相同。传统的细胞破 裂方法有机械碾磨法、反复冻融法、超声波法、化学溶解法和酶解法等。随着!5*’ 的出现和发展，研制 微型化的细胞破裂装置引起了广大研究者的兴趣。6789/［4 ］利用%%’ 技术将传统的机械破胞技术引 入微芯片中，在硅片上制备出: +4 ; 的鱼钩状微结构，并利用锋利的钩状微结构刺破羊血细胞，使细 胞内的物质释放出来。该法破裂细胞原理简单，但工艺难度较大，不易与其它芯片相集成。)/8=8?@ ［, ，. ］ 等 利用压电薄膜制得一种微型化的超声波破裂细胞装置，2#A 内完成细菌孢子的破碎。该法制备工 艺简单，破胞效果好，多用于裂解微生物细胞，但是不易于集成化和微型化。文献［$ ，1 ］报道了直接利 用聚合酶链式反应（B6C ）加热器升温破裂细胞，能较好的集成在B6C 芯片上，但不适用于所有生物细 胞。根据细胞的电致穿孔效应，制得电法细胞破裂芯片，它可分为电场型和电极型两种。电场型细胞破 ［# ，］ 裂芯片易与电泳芯片集成，通过比较正常细胞和病态细胞破裂碎片的电泳分离峰进行医学诊断