实验十二蜱、螨的形态观察和螨病的诊断技术.docVIP

实验十二 蜱、螨形态观察和螨病诊断技术 一、实验目的及要求 掌握蜱螨及其病料的采集方法，认识各种蜱螨的一般形态特点；掌握疥螨、痒螨的主要区别；掌握螨病的诊断方法。了解蜱螨对畜禽健康的危害方式。 二、实验器材 器械：体视解剖显微镜、透视生物显微镜，载玻片、盖玻片，标本瓶，剪刀、镊子、手术刀。 药品：50%甘油溶液、5%甘油酒精（7%）；5%或10%福尔马林Bless）液蜱、螨的形态和螨病的①疥螨、痒螨的刮取与观察。 螨的个体较小，常需刮取皮屑，于显微镜下寻找虫体或虫卵。首先详细检查病畜全身，找出所有患部，然后在新生的患部与健康部交界的地方，剪去长毛，用锐匙或外科刀在体表刮取病料，所用器械在酒精灯上消毒后，与皮肤表面垂直，反复刮取表皮，直到稍微出血为止，此点对检查寄生于皮内的疥螨尤为重要。将刮到的病料收集到培养皿或其他容器内，取样处用碘酒消毒。 在野外进行工作时，为了避免风将刮下的皮屑吹去，刮时可将刀子沾上甘油或甘油与水的混合液。这样可使皮屑粘附在刀上。将刮取到的病料收集到容器内带回准备检查与标本制作。 a直接检查法。 将刮下物放在黑纸上或有黑色背景的容器内，置温箱中（30～40℃）或用白炽灯照射一段时间，然后收集从皮屑中爬出的黄白色针尖大小的点状物在镜下检查。此法较适用于体形较大的螨（如痒螨）。检查水牛痒螨时，可把水牛牵到阳光下揭去“油漆起爆”状的痂皮，即可看到淡黄白色的麸皮样缓慢爬动的痒螨。还可以把刮取的皮屑握在手里，不久会有虫体爬动的感觉。 b显微镜下直接检查法。 将刮下的皮屑，放于载玻片上，滴加50%甘油溶液，覆以另一张载玻片。搓压玻片使病料散开，置显微镜下检查。 c虫体浓集法。 为了在较多的病料中，检出其中较少的虫体，可采用浓集法提高检出率。先取较多的病料，置于试管中，加入10%氢氧化钠溶液。浸泡过夜（如急待检查可在酒精灯上煮数分钟），使皮屑溶解，虫体自皮屑中分离出来。而后待其自然沉淀（或以每分钟2000r的速度离心沉淀5min ) , 虫体即沉于管底，弃去上层液，吸取沉渣镜检。 也可采用上述方法的病料加热溶解离心后，倒去上层液，再加入60%硫代硫酸钠溶液，充分混匀后再离心2～3min，螨体即漂浮于液面，用金属圈蘸取表面薄膜，抖落于载玻上，加盖玻片镜检。 d温水检查法。 即用幼虫分离法装置，将刮取物放在盛有40℃左右温水的漏斗上的铜筛中，经0.5～1h，由于温热作用，螨从痂皮中爬出集成小团沉于管底，取沉淀物进行检查。 也可将病料浸人40～45℃的温水里，置恒温箱中，1～2h后，将其倾在表玻璃上，解剖镜下检查。活螨在温热的作用下，由皮屑内爬出，集结成团，沉于水底部。 e培养皿内加温法。 将刮取到的干的病料，放于培养皿内，加盖。将培养皿放于盛有 40～45 ℃ 温水的杯上，经10～15min后，将皿翻转，则虫体与少量皮屑粘附于皿底，大量皮屑则落于皿盖上，取皿底检查。可以反复进行如上操作。该方法可收集到与皮屑分离的干净虫体，供观察和制作封片标本之用。 ②蠕形螨的检查。 蠕形螨寄生在毛囊内，检查时先在动物四肢的外侧和腹部两侧、背部、眼眶四周、颊部和鼻部的皮肤上按摸有否砂粒样或黄豆大的结节。如有，用小刀切开挤压，看到有脓性分泌物或淡黄色干酪样团块时，则可将其挑在载片上，滴加生理盐水1～2滴，均匀涂成薄片，上覆盖片，在显微镜下进行观察。 2．周围环境中蜱螨的采集。 （1）畜舍地面和墙缝内的蜱螨的采集。 在牛舍的墙边或墙缝中，可找到璃眼蜱。在鸡的窝巢内栖架上，可找到软蜱和刺皮螨。 （2）牧地上蜱的收集。 用白绒布旗一块，长45～100cm，宽25～100 cm，一边穿入木棍，在木棍两端系以长绳，以便拖曳。将此旗在草地上或灌木间拖动，草地或灌木上的蜱即附着在旗面上。检查并收集于小瓶内。 （二）蜱螨的固定与保存 在动物体表或外界环境中采集到蜱螨类，可按以下方法固定和保存。 1．湿固定。 蜱、螨用液体固定可使标本保持原来形态，利于教学和科研用。蜱应小心地由动物体表摘下或在拖网上取下，防止蜱的假头断落，先投入开水中数分钟，让其肢体伸直，便于日后观察。然后保存在 70 %酒精内，为防止酒精蒸发使蜱的肢体变脆，可加入数滴甘油。或把蜱螨类先经加温的70%酒精（60～70℃）固定，一天后保存于5%甘油酒精（7%）中；也可用5%10%福尔马林和Bless）液福尔马林原液7ml，酒精（70%）90ml，冰醋酸（临用前加入）3～5ml混合配成固定保存。所有保存标本须详细记录标本名称、宿主、采集地点、采集日期及采集者姓名。Bless）液 脚须：两侧为一对脚须，共四节，分第一、二、三、四节。第四节最小，居于第3节腹面的凹窝内。在鉴定上有意义的是第二、第三节，其长度与宽度随种属而不同。脚须的内侧形成沟槽，抱合着螯肢与口下板。并在吸血时起固定和支