养殖石斑鱼溃疡病病原哈维氏弧菌胞外产物的研究.pdfVIP

养殖石斑鱼溃疡病病原哈维氏弧菌胞外产物的研究 陈雅芳 ,王 　军 ,苏永全 ,覃映雪 ,王世锋 (厦门大学 海洋与环境学院 ,福建 厦门 36 1005 ) ( ) ( 摘要 : 以网箱养殖的患溃疡病青石斑鱼 Ep i nep hl us aw oa ra 和斜带石斑鱼 Ep i nep hl us co ) ( ) ioi des 分离的哈维氏弧菌 V ibrio ha rvey i TS628 菌株为研究对象 ,采用平板玻璃纸覆盖技 ( ) 术 ,获得该菌株的胞外产物 ECP ,并对其成分进行分析 。利用杯碟法研究表明 , 哈维氏弧 菌 TS628 菌株的胞外产物具有酪蛋白酶 、明胶蛋白酶 、淀粉酶 、脂肪酶 、卵磷脂酶等多种酶 ( ) 活性和溶血活性 ,且溶血性物质具有热不稳定性 。SD S聚丙烯酰胺凝胶电泳 SD SPA GE 及考马斯亮蓝 R250 染色分析表明 , ECP 蛋白条带主要集中在分子质量范围25 . 0～66 . 2 ku 之间 ,经不同时间培养所获得的 ECP 在凝胶上显示出的蛋白条带几乎一致 。采用复性电泳 ( ) 方法 GPA GE 分析了哈维氏弧菌及其它 4 种弧菌属细菌的 ECP 蛋白酶活性 ,结果发现哈 维氏弧菌 ECP 在酸性条件下 ,蛋白酶活性较强 ,在碱性条件下 ,蛋白酶带明显减少 ,活性很 弱 。在相同的p H 条件下 ,5 种弧菌中以副溶血弧菌的 ECP 蛋白酶活性最强 ,种类多 ,分子 质量范围宽 ;而哈维氏弧菌的蛋白酶带较少 ,活性也稍弱 。 ( ) ( ) 关键词 :青石斑鱼 Ep i nep hl us aw oa ra ; 斜带石斑鱼 Ep i nep hl us coioi des ; 哈维 氏弧菌 ( V ibrio ha rvey i) ;胞外产物 ;溃疡病 中图分类号 :Q936 　　文献标识码 :A 　　文章编号 (2006) ( ) ( 　　弧菌病是世界各地海水养殖鱼 、虾 、贝类等动物 Ep i nep hl us aw oa ra 和斜带石斑鱼 Ep i nep hl us co 中普遍流行 、危害最大的细菌性疾病之一 [ 1] 。弧菌 ioi des ) 分离得到 ,副溶血弧菌 、河流弧菌 、溶藻弧菌 、 ( ) [ 10 ] 的致病性取决于其与宿主细胞间的相互作用 ,在致 费氏弧菌 V ibrio f ische ri 菌株由本实验室提供 。 病过程中 ,弧菌会产生多种胞外产