以氣相層析質譜儀分析氧化壓力指標水楊酸鹽產物並評估多酚性.pdfVIP

以氣相層析質譜儀分析氧化壓力指標-水楊酸鹽產物並評估多酚性化 合物清除氫氧自由基之能力 Using Salicyate Adducts as an Oxidative Stress Maker by GC/MS and Evaluate Hydroxyl Radicals Scavenging Effect of Polyphenols 中文摘要 在所有有氧生物體中 ，經由呼吸爆炸 (respiratory burst)所產生之超氧化陰離子自 由基(superoxide anion radical)和過氧化氫(hydrogen peroxide) ，在螯合鐵存在下 ， 進行Fenton’s 反應 ，產生氫氧自由基( ˙O H) 。它是最具活性的氧自由基 ，以 107-1010 M-1S-1 的擴散速率(diffusion control rate)與大多數生物分子作用 ，引起 細胞膜脂質過氧化反應(membrane lipid peroxidation) ，蛋白質凝集(protein aggregation)和DNA 羥化反應(hydroxylation) ，因而瓦解細胞的功能和完整性。 由於氫氧自由基的半衰期短和反應性高，不易直接偵測，目前偵測體內氫氧自由 基最有效且具特異性的方法之一是利用芳香環上羥化(aromatic hydroxylation)的 方法。以水楊酸鹽(salicylate)與氫氧自由基經加成反應產生之羥化物 ，被廣泛的 應用在體外或體內試驗，以偵測氫氧自由基之生成或評估具氫氧自由基清除作用 的效力。 在體外試驗 ，以Fenton’s 試劑所產生之氫氧自由基與salicylate 反應，其生成物 (2,3-DHBA 及2,5-DHBA)以氣相層析質譜分析方法測定 ，並評估酚性化合物(如 類黃鹼素 ；flavonoids) 、維他命C 、E 、抗氧化劑(如probucol)等測試物之清除氫 氧自由基的能力，其大小依序為quercetin (55.8%) ，rutin (54.7%) ，trolox (51.1%) ， thiourea (50.1%) ，myricetin (48.1%) ，luteolin (45.7%) ，(-)-epigallocatechin (41.9%) ， (-)-epicatechin (41.7%) ，morin (41.3%) ，(+)-catechin (40.6%) ， (+)-gallocatechin (38.8%) ，kaempferol (38.1%) ，wogonin (31.8%) ，liquiritin (30.9%) ，bacailein (30.2%) ，DMSO (30.2%) ，capillarisn (27.3%) ，genistein (26.9%) ，probucol (26.9%) ， β-carotene (26.6%) ， ascorbic acid (-) ，d- α-tocopherol (-) 。 在體內試驗中，先以腹腔注射salicylate ，觀測兔子體內受 1,1,2,2-tetrachloroethane 抑制cytochrome P450 後，視其羥化產物 2,3-DHBA 及2,5-DHBA 生成量之變化。 英文摘要 All aerobic organisms produced superoxide anion and hydrogen peroxide via respiratory burst. In the presence of chelated iron, these species are converted to hydroxyl radicals through a Fenton reaction . The hydroxyl radical is an extremely reactive oxidizing radical that will react with most biomolecules at diffusion-controlled rates (107-1010 M-1S-1), and cause membrane lipid peroxidation, protein aggregation, and DNA hydroxylation, thereby disrupting cellular functions and integrity. Because hydroxyl radical has a very short h