一种葡聚糖芯片的再生方法、表征及其应用3.pdfVIP

中国生物工程杂志 　Ch ina B iotechno logy, 2007 , 27 ( 8) : 59 ～62 一种葡聚糖芯片的再生方法 、表征及其应用 1, 2 2 2 1 1 1, 2 李雪玲 　方志俊 　黄明辉 　曹慧敏 　赵建龙 　杨梦苏 ( 1 中国科学院上海微系统与信息技术研究所 　上海 　200050) (2 香港城市大学深圳研究院　深圳 　518057) ( ) 摘要 　表面等离子体共振 su rface p la smon re sonance, SPR 生物传感器 ,作为一种适时快捷 ,无需 标记的生物分子相互作用研究工具 , 已广泛应用于生物化学分析与研究 。羧 甲基化葡聚糖修饰 的 CM 5传感芯片是 B iacore 系列仪器应用最为普遍的核心部件 , 目前 CM 5 芯片主要从法玛西亚 公司购买 ,价格昂贵 ,且一旦共价交联的受体分子失活 ,就不能重复利用 。阐述了一种简便 、低成 本 、用于 SPR 生物传感器的葡聚糖修饰金膜芯片的再生方法及其表征和应用 。用此方法再生的 ( 芯片能被循环伏安法和原子力显微镜很好地表征 ,并成功地用于抗前列腺特异性抗原 p ro state - sp ecific an tigen , PSA ) 固定和 PSA 检测 , 同时测定了 PSA 与其抗体之间的动力学和亲和常数 。 关键词 　SPR 生物传感器 　羧甲基化葡聚糖修饰表面 　传感芯片再生 　前列腺特异性抗原检测 　动力学和亲和力 中图分类号 　Q6 - 3 　　SPR 生物传感器因其无需标记 ,适时快捷的优点 , [ 1 ] [ 2 ] 1　材料与方法 已广泛应用于蛋白质 蛋白质 ,蛋白质 DNA , 多糖 蛋白质 相 互 作 用 [ 3 ] 。SPR 生 物 传 感 器 中, 瑞 典 的 1. 1　仪器与试剂 B iacore系列在市场上 占有很大的份额 ; 因巯基 自组装 　　B iacoreTM X 生物传感器 , CM 5 ( carboxym ethylated ( ) 单分子层 SAM 制备简单 、稳定性好 、膜表面缺陷少 、 ) ( dextran 传感芯片 , HB SEP 缓冲液 10 mmol/L H ep es, 与其共价交联的羧基化葡聚糖凝胶亲水性好 、羧基与 150 mmol/L N aC l, 3. 4 mmol/L ED TA , 0. 05% P20 , pH 生物分子氨基偶联的普遍适用性等 , CM 5 传感芯片应 7. 4 ) , 氨 基 偶 连 试 剂 : 氮 羟 基 丁 二 酰 亚 胺 ( N 用最为广泛 。但 CM 5 传感芯片价格昂贵 , 芯片表面经 ) (