载体介导的RNAi技术抑制宫颈癌CaSki.pdfVIP

维普资讯 四川 大 学 学 报 ‘医 学 版 JSichuanUniv (M edScEddi) 2…oo7；’3。8。(1)：。6—8 SciE 载体介导的RNAi技术抑制宫颈癌 CaSki 细胞 E7基因的表达 王丹青，彭芝兰△，牛晓宇，李大可 四川大学华西第二医院 妇产科 (成都 610041) 【摘要】 目的 探讨 HPV16E7特异性小干扰 RNA(siRNA)表达载体对官颈癌 CaSki细胞E7基因的抑制作 用。方法 构建 HP 16E7特异性 siRNA 表达载体 ，利用脂质体转染 CaSki细胞 ，以荧光定量 RT-PCR 及 Westernblot检测其对 E7mRNA及蛋 白表达的影响。结果 3种表达载体 P1、P2、P3均能抑制 CaSki细胞 E7基 因mRNA 和蛋 白的表达 ，其 中载体 P1抑制作用最强，在转染后 3周 ，对 E7mRNA和蛋 白的抑制率分别 为 92．86 和 81．O 。结论 HP 16E7siRNA表达载体能有效地抑制宫颈癌 CaSki细胞E7基因的表达。 【关键词】 HPV16E7 小干扰 RNA表达载体 官颈癌 CaSki细胞 RNA干扰 【中图分类号】 R737．33 InhibitingE7OncogeneinCaSkiCellsofCervicalCancerbyVector-basedRNA InterferenceTechnique AⅣG Dan-qing，PENG Zhi-lan ，NlU Xiao-yu LIDa-ke． DepartmentofObstetricsandGynecology．W estChina Second r0spital，SichuanUniversity。Chengdu610041，China [Abstract】 Objective To testoftheeffeCtofvector—basedRNA interference (RNAi)techniqueon inhibitingH PV16E7geneinCaSkicellsofcervicalcancer．M ethods TheHPV16E7一specificsiRNA expression vectorsP1，P2andP3wereconstructedandtransfectedintoCaSkicellsbyliposome．TheexpressionofH 尸 16E7 mRNA andproteinweredetectedbyreal—timeRT—PCR andW esternblot．Results TheexpressionofHPV16E7 mRNA and protein decreased with the transfection ofP1，P2and P3．VectorP1had thestrongestinhibition effect，with an inhibition rates of92．86 and 81．0 forthe expression ofHP 16E7 mRNA and protein respectivelythreeweeksaftertransfection．Conclusion TheexpressionofE7geneinCaSkicellscanbeinhibited bvH 尸 16E7一specificsiRNA expressionvector． [Keywords] HP 16E7 siRNAexpressionvector Cervicalcancer CaSkicells RNAi 流行病学和病毒学资料已经证 明，高危型人乳 因的影响。 头瘤病毒 (humanpapillomavirus，HPV)16型感染 1 材料与方法 和子宫颈癌有着密切的因果关系。其中E7基因已 被证实为转化基因，其编码 的E7蛋 白与细胞转化