枯草芽孢杆菌发酵产碱性蛋白酶的研究.pdfVIP

※生物工程 食品科学 2009, Vol. 30, No. 23 347 姚 刚，程建军* ，孙 鹏，李倪薇 (东北农业大学食品学院，黑龙江哈尔滨 150030) 对枯草芽孢杆菌发酵产碱性蛋白酶的培养基成分及培养条件进行优化。在单因素试验的基础上通过正交 试验确定发酵培养基各成分最适宜配比。采用此优化培养基对发酵菌株的培养条件进行单因素试验。结果表明最 佳的发酵培养基成分为：酵母浸粉2% 、蔗糖1.0%、吐温-80 0.5% 、硫酸镁0.02% ；发酵条件为：接种量4% ( V/V) 、起始pH9 ，在150ml 的三角瓶中，装液量为25ml ，发酵36h 。在最佳培养条件下，碱性蛋白酶粗酶活 力可达1670U/ml。 碱性蛋白酶；枯草芽孢杆菌；发酵；培养基 Preparation of Alkaline Protease by Fermentation of Bacillus subtilis YAO Gang ，CHENG Jian-jun* ，SUN Peng，LI Ni-wei (College of Food Science, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, China) Abstract ：Medium compositions and fermentation conditions for producing alkaline protease through the fermentation of Bacillus subtilis were optimized by orthogonal design based on single factor experiments. Results indicated that optimal medium compositions were 2% yeast powder, 1.0% sugar, 0.5% Tween 80, and 0.02% MgSO4 . The optimal fermentation condition was 4% inoculation amount in 25 ml of medium filled in 150 ml Erlenmeyer flasks at the initial pH 9 for 36 h of fermentation. The activity of alkaline protease obtained at this optimal fermentation condition was 1670 U/ml. Key words ：alkaline protease ；Bacillus subtilis ；fermentation ；medium 中图分类号：Q935 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2009)23-0347-05 碱性蛋白酶是指在pH 值为碱性的条件下水解蛋白 不断提高，但大多数采用进口的碱性蛋白酶制剂，并 质肽键的酶类，其最适pH 值一般为9 ～11 ，属内肽酶 且大规模工业生产中用的碱性蛋白酶还是主要依赖进 [6] 中的丝氨酸蛋白水解酶类，除可催化蛋白质水解为氨基 口 。本实验通过正交试验优化枯草芽孢杆菌发酵培养 酸外，在有机溶剂中还可催化多肽的合成[1] 。它在商业 基，以期进一步提高枯草芽孢杆菌所产碱性蛋白酶粗酶 中的巨大应用前景及在基础研究中的重要作用，吸引着 的活力。 国际国内的许多公司及研究单位竞相对其进行多方面的