微流控芯片免疫分析方法研究进展.pdfVIP

第 33卷 分析化学 ( FENX I HUAXU E) 　评述与进展 第 10期 　　　 　 　　　　　　 　　　　　　 　 　　　 2005年 10月 Ch inese Journal of A nalytical Chem istry 1489 ～1493 评述与进展 　微流控芯片免疫分析方法研究进展 贾宏新 　吴志勇 　方肇伦 (东北大学分析科学研究中心 ,沈阳 110004) 摘 　要 　综述了微流控芯片免疫分析方法研究新进展 。对有关芯片进行了初步分类 ,并评述了各类芯片的性 能与优缺点 。尤为关注免疫分析微流控芯片在临床诊断、环境分析等领域的应用研究 。引用文献 33篇 。 关键词 　免疫分析 ,微流控芯片 ,评述 1　引　　言 免疫分析方法具有极高的选择性和灵敏度 ,可广泛用于临床诊断、环境分析等领域 。常规免疫分析 通常需要数 h甚至 1 d 以上 ,操作过程复杂 , 需消耗大量昂贵的免疫试剂 。而且检测设备较大 ,难以满 ( ) 足现场检验 po in tofcare te sting, POCT 要求 。近来微流控芯片已从分离检测发展为包括复杂试样前 处理的高功能全分析系统 ;从分析工具发展到包括在线检测的微型化学反应与合成手段 。在微流控芯 片上进行免疫分析 ,将微流控芯片的分析能力和抗原 抗体反应的特异性相结合 ,能有效的克服常规免 疫分析的缺点 ,使得反应效率提高 ,操作步骤简化 ,检验时间缩短 ,样品、试剂和能量消耗大大降低 。用 于免疫分析的微流控芯片是运用微加工技术建立微米级的免疫反应空间 , 由于尺寸上的减小 ,加快了反 应动力学过程 ,使得基于生物大分子扩散控制的免疫反应速度提高几个数量级 。微流控芯片多种功能 结合与集成化的特点也使微流控芯片上的免疫分析与常规免疫分析相比有很多潜在的优势 , 因此受到 越来越多的关注 。本文对免疫分析微流控芯片的类型、相关技术及其应用的新进展进行综合评述 。 2　微流控芯片上免疫分析的特性和分类 微流控芯片上免疫分析与常规免疫分析法的差异主要表现为扩散距离减小 、微反应空间比表面积 ( ) 面积 /体积 增大 。分子迁移时间和比表面积是影响反应速率的关键因素 ;迁移时间与扩散距离平方 成正比,生物大分子扩散系数一般在 10 - 5 cm2 / s或更小 ,当扩散距离为 1 cm 时 ,迁移时间需数 h 到 1d; μ 当扩散距离为 m 级时 ,迁移时间不足 1 m in。扩散距离与比表面积成反比,在比表面积较大的微流控 芯片中 ,扩散距离显著缩短 。文献 [ 1, 2 ]中报道了在带有微堰结构的芯片上实现免疫分析 。固定有抗 ( 原的微珠被截 留在微堰处 , 抗原 抗体反应在微珠表面完成 。在常规 的微孔板 直径 6. 5 mm , 深 ) μ 2 3 1. 5 mm 中 , 50 L 液体比表面积约为 13 cm / cm ,抗体需运动 1. 5 mm 与抗原反应 ;而在芯片上 , 由于 μ μ μ 空间尺寸小 ,微通道长宽高分别为 100、100、200 m ,填充 11粒直径为 45 m 的微珠 , 50 L 液体比表面 2 3 μ 积达 480 cm / cm ,抗体到反应固体表面的最长扩散距离小于 20 m 。同常规方法相比, 比表面积增加 37倍 ,抗体运动到抗原处迁移时间缩短到 1 /