酶电极上葡萄糖氧化酶的活性的X射线微区分析.pdfVIP

第2 5 卷 , 第7 期 　 　　　　　　　　　　　光 谱 学 与 光 谱 分 析 Vol2 5 ,No 7 ,pp 115 11154 2 0 0 5 年 7 月 　　　　　　　　　　　 　Spectroscopy and Spectral Analysis July , 2005 　 酶电极上葡萄糖氧化酶的活性的 X 射线微区分析 李 　彤 , 姚子华 , 仇满德 , 安 　伟 , 史大刚 河北大学化学与环境科学学院 , 河北 保定 　071002 摘 　要 　利用 X 射线微区分析 , 对二氧化硅溶胶凝胶包埋于普鲁士蓝修饰玻碳电极上的葡萄糖氧化酶的活 ( ) 性进行了分析 ; 以Ce NO3 3 为捕捉剂 , 底物葡萄糖经葡萄糖氧化酶作用产生过氧化氢 , 后者与捕捉剂反应 生成沉淀于酶的活性部位 。从 X 射线微区分析结果表明: 酶电极表面固定化酶的分布均匀 , 且保存较高的酶 活 , 从微观的角度说明了酶电极的性能与酶电极表面酶活分布的关系 。此法制备的葡萄糖氧化酶电极具有 较高的灵敏度 , 稳定性 , 这与电化学测试结果是一致的。 主题词 　X 射线微区分析 ; 葡萄糖氧化酶 ; 酶电极 ; 酶活 ( ) 中图分类号 : O6579 ; O6571 　　文献标识码 : A 　　　文章编号 : 2005 捕捉剂 , 电极上其他修饰物质 、固定化酶与捕捉剂 , 捕捉剂 引　言 与底物之间的干扰 。我们已报道的固定化葡萄糖氧化酶活性 X 射线分析是利用铁离子作为捕捉剂[5 ] , 生成金属沉淀 , 聚 　　近年来 , 随着生物传感器的迅猛发展 , 作为生物传感器 焦电子束对固定化酶表面进行激发 , 有活性的部位发射出 Fe 中研究的最多 , 应用最广的电化学生物传感器的研究更是引 的特征 X 射线 , 利用 X 射线能谱分析即可定位酶的活性部 起人们极大的关注 。我们研究制备安培型葡萄糖氧化酶传感 位 。由于我们研究使用的酶电极是利用普鲁士蓝修饰电极结 器时[ 1] , 发现酶电极表面的性质如致密性 、酶分布的均匀程 合二氧化硅溶胶凝胶膜固定葡萄糖氧化酶的 , 因此不能用 度等对其性能有一定的影响 。以往对修饰电极的表征手段多 铁盐作为捕捉剂 。本工作研究了利用 X 射线微区分析对酶电 是对其表面形貌的分析[2 , 3 ] , 也有报道对电极上酶的活性大 极上凝胶膜中活性葡萄糖氧化酶定位的可能性和最佳定位条 小进行分光光度法宏观估测的[4 ] , 但都不能说明表面酶的分 件的选择 。利用铈盐作为捕捉剂 , 葡萄糖为底物 , 经葡萄糖 布情况 。如果能对酶电极上的酶活进行定位 , 清晰地确定电 氧化酶电极表面溶胶凝胶膜固定的酶与其作用得到 H O ,