中国对虾微卫星引物筛选及反应条件优化.pdfVIP

维普资讯 第 27卷 第 1期 海 洋 水 产 研 究 Vo1．27，No．1 2 O O 6 年 2月 MARINEFISHERIESRESEARCH Feb．，2006 中国对虾微卫星引物筛选及反应条件优化 孟宪红 孔 杰 刘 萍 高 焕 (中国水产科学研究院黄海水产研究所，青岛 266071) (中国科学研究院海洋研究所，青岛 266071) 摘要 对 33对 中国对虾 ( P，．0 “P“5chinensis)微卫星 引物进行筛选，确定 了其 中 ll对 引物 的最优 PCR反应条件 ，包括各对 引物的退火温度、反应体系中引物、Mg。、dNTPs含量等，为建立微 卫星多重 PCR技术、最终使微卫星标记成为中国对虾家系识别的有效工具奠定了基础。 关键词 中国对虾 (FP彻 0声PⅡP“chinensis) 微卫星DNA 家系识别 引物 聚合酶链式反应 中图分类号 Q7；Q959．223 ．63 文献识别码 A 文章编号 1000—7075(2006)O10035—05 SSR primerscreeningandoptimization 0fF ，．Dp n chinensis MENG XianHong KONGJie LIU Ping GAO Huan。 ( Yellow SeaFisheriesResearchInstitute，ChineseAcademyofFisherySciences，Qingdao266071) (。InstituteofOceanology，TheChineseAcademyofSciences，Qingdao266071) ABSTRACT Theoptimizedreactionsystem，includingtheannealingtemperature，theprim— ers，andtheconcentrationofMg anddNTPs，etc．，of11pairsofprimersweredeterminedby screening33pairsofSSRprimersofFP，2，2Pr0户P，2以Pz￡schinensis．Theresultmaylayafoundation forestablishing theSSR MultiplePCR technique，whichwillprobabllybecometheefficient methodofthefamilies’identificationofFP，2Pr0户P，2口e“schinensisinthefuture． KEY WORDS FP，2，2Pr0 P，2以Pz￡schinensis M icrosatelliteDNA Families’identification Primer PolymeraseChainReaction (PCR) 微卫星DNA (MicrosatelliteDNA)又称单一的序列重复(SimpleSequenceRepeat，SSR)，由1～6个碱基 对的核心序列串联重复而成，其位点数 目巨大并随机分布于整个基因组中，具有丰富的长度多态性信息且按孟 德尔方式遗传，近年来越来越广泛的应用于遗传连锁图谱的构建、种质鉴定、家系分析以及遗传疾病的诊断等 (Aliaheta1． 1999；McConnelleta1． 1995)，为分子生物学研究热点之一 中国对虾(FP P，．0声鲫n “chinensis)是我国海水养殖重要经济种类 。由于 1993年我国发生 中国对虾暴 发性流行病，致使育苗、养殖的成活率和效益