实验一食品中防腐剂的紫外光谱测定.pdfVIP

仪 器 分 析 实 验 讲 义 1 实验一 食品中防腐剂的紫外光谱测定 一、实验目的 通过实验了解食品防腐剂的紫外光谱吸收特性，并利用这些特性对食品中所含的防腐剂进行定 性鉴定。 掌握最小二乘法处理光度分析数据的方法并对食品中防腐剂的含量进行定量测定。 二、实验原理 为了防止食品在储存、运输过程中发生变质、腐败，常在食品中添加少量防腐剂。防腐剂使用 的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定。苯甲酸和山梨酸以及它们的钠盐、钾盐是食品卫 生标准允许使用的两种主要防腐剂。苯甲酸具有芳烃结构，在波长 228nm 和 272nm 处有 K 吸收带和 B 吸收带；山梨酸具有α、β不饱和羰基结构，在波长 250nm 处有π→π＊跃迁的 K 吸收带,因此 根 据它们的紫外吸收光谱特征可以对它们进行定性鉴定和定量测定。 由于食品中防腐剂用量很少，一般在千分之一左右，同时食品 中其它成分也可能产生干扰，因 此需要预先将防腐剂与其它成分分离，并经提纯浓缩后进行测定。常用的从食品中分离防腐剂的方 法有蒸馏法和溶剂萃取法等。本实验采用溶剂萃取的方法，用乙醚将防腐剂从样品中提取出来，再 经碱性水溶液处理及乙醚萃取以达到分离、提纯的目的。 采用最小二乘法处理标准溶液的浓度和吸光度数据，以求得浓度与吸光度之间的回归直线方程， 并根据直线方程计算样品中防腐剂的含量。 三、仪器、试剂及材料 1. 仪器：UV-2000 紫外可见分光光度计和 TU-1901 紫外可见分光光度计；电子天平；带盖石 英比色皿 2个； 分液漏斗 150mL，250mL； 容量瓶 0mL，25mL，100mL； 移液管 1 mL ，2mL， 5mL，10 mL -1 -1 2. 试剂： 苯甲酸；山梨酸；乙醚；NaCl；NaHCO3 (1％水溶液）；HCl（0.05mol·L ，2mol·L ） 待测样品：饮料、果汁、果酱或酱油。(学生自备) 四、实验步骤 1. 认真阅读 UV-2000紫外可见分光光度计的操作说明书。 2．样品中防腐剂的分离 准确称取待测样品 2.0g，用 40mL 蒸馏水溶解，移入 150mL 分液漏斗中，加入适量的粉状 NaCl， 待溶解后滴加 0.lmol·L-1HCl，使溶液的 pH＜4。依次用 30mL、25mL 和 20mL3 份乙醚萃取样品溶液， 合并乙醚溶液并弃去水相。用 2 份 30mL0.05mol·L-1HCl 洗涤乙醚萃取液，弃去水相。然后用 3 份 -1 20mL1％NaHCO 水溶液萃取乙醚溶液，合并 NaHCO 溶液，用 2mol·L HCl 酸化 NaHCO 溶液并多加 lmL， 3 3 3 将该溶液移入 250mL 分液漏斗中。依次用 25mL、25mL、20mL乙醚分 3 次萃取已酸化的 NaHCO3 溶液， 合并乙醚溶液并移入 100mL 容量瓶中，用乙醚定容后吸取 2mL于 10mL 容量瓶中，定容后供紫外光谱 测定。 3．防腐剂定性鉴定 取经提纯稀释后的乙醚萃取液，用 1cm 的石英吸收池，以乙醚为参比，用 TU-1901 紫外可见分 光光度计在波长 210～310nm 范围作紫外吸收光谱，根据吸收峰波长及吸收强度确定防腐剂的种类。 4．制作工作曲线 ⑴ 配制苯甲酸（或山梨酸）标准溶液 准确称取 0.20g 苯甲酸，用乙醚溶解，移入 50mL 容量瓶中定容，吸取该溶液 2mL 用乙醚稀释至 50mL，此溶液含苯甲酸为 0.16mg·mL-1 作为储备液。吸取 10mL 储备液于50mL 容量瓶中，定容后成 为 32μg·mL-1 苯甲酸标准溶液。 分别吸取苯甲酸标准溶液 0.5mL，1.0mL，1.5mL，2.0mL 和 2.5mL