SBT 10320-1999 熟料N型蛋白试验（试 行）.pdfVIP

中华人民共和国专业标准 熟 料 N 型 蛋 白 试 验 SB T 10320-19997 （试行） Detection of N -type protein ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 本方法适用于酿造酱油半成品熟料中N 型蛋白的测定。用N 型试验可衡量原料中蛋 白质蒸熟程度,评判蒸料的质量。 1 仲裁法 1.1 设备 与消化率测定法同ZB X 66032—87 。 1.2 试剂及溶液 1.2.1 酶液:与消化率测定法同ZB X 66032—87 。 1.2.2 pH7.2 磷酸盐缓冲液: 与消化率测定法同, 见ZB X 66032—87 。 1.2.3 氯化钠: 分析纯。 1.3 操作 1.3.1 熟料浆制备: 与消化率测定法同 (ZB X 66032—87) 。 1.3.2 水解: 精确称取熟料浆6g 左右 (精确到0.2mg)于150mL 锥形瓶中,再加入酶液 75mL,氯化钠20g,pH7.2 缓冲液20mL,摇匀,在瓶口塞上橡皮塞后,置于恒温水浴锅中,45℃ 保温24h(或48h) 。 1.3.3 过滤: 水解结束后,过滤或离心分离。清液在沸水浴中加热至90℃。用冷水急 速冷却,再过滤或离心分离。 1.3.4 比色: 吸取上述清液2mL 于试管中,再加入蒸馏水10mL,把试管置沸水浴中加热 5min,立刻在冷水中急速冷却。试管中出现混浊或沉淀,N 型为阳性。 若要定量分析,可用浊度计或比色计测定,并用未煮沸的上清液作空白对照。 2 近似法 2.1 设备及试剂: 和仲裁法相同。 2.2 操作 2.2.1 熟料浆制备: 与消化率测定法同 (ZB X 66032—87) 。 2.2.2 水解: 与消化率测定法同 (ZB X 66032—87) 。 2.2.3 加盐:N 型试验可和消化率测定同时做。水解结束后,在锥形瓶中加入氯化钠 20g,摇匀,使氯化钠溶解。冷却后定容至100mL,过滤或离心分离后,用于消化率测定 (ZB X 66032—87) 。 2.2.4 过滤: 把余下的约一半水解液振摇20min,再过滤或离心分离。清液在沸水浴 中加热至90℃,再用冷水急速冷却,再过滤或离心分离。 2.2.5 吸取第二次过滤或离心的清液2mL 于试管中,再加入蒸馏水10mL,置试管于沸水 浴中加热5min,立刻在冷水中急速冷却。 试管中出现混浊或沉淀, N 型为阳性。 ━━━━━━━━━ 附加说明: 本标准由商业部副食品局提出。 本标准由上海市酿造科学研究所起草。 本标准主要起草人须凤高。 ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 中华人民共和国商业部1987-11-20 批准 1988-07-01 实施