紫花苜蓿下胚轴高频离体再生体系的建立.pdfVIP

第 36卷 第 11期 西北农林科技大学学报(自然科学版) Vol_36 No．11 2008年 i1月 JournalofNorthwestAFUniversity(Nat．Sci．Ed．) NOV． 2008 紫花苜蓿下胚轴高频离体再生体系的建立 杨丽辉 ，陈耀锋 ，韩巧玲 ，李春莲 (西北农林科技大学 a．动物科技学院，b．农学院，陕西 杨凌 712100) [摘 要] 【目的】以北极星、阿尔刚金、皇后 2000及国产紫花苜蓿4个苜蓿品种下胚轴为外植体，建立其稳定、 高效的离体培养再生体系，为基因转化改 良苜蓿性状奠定基础。 【方法】研究了种子预处理方法、培养基、基因型以及 蔗糖质量浓度对苜蓿下胚轴分化特性的影响。 【结果】低温 4C预处理有利于提高苜蓿下胚轴愈伤组织的出愈率和 绿苗分化率 ；其最佳诱导激素组合为 “MS+1．0mg／L2，4一D+2．0mg／L6-BA+5．5g／L琼脂+30g／L蔗糖”和 “MS +2．0mg／L2，4一D+2．0mg／L6-BA+5．5g／L琼脂+30g／L蔗糖”；愈伤组织分化的最佳培养基为 “MS+0．3mg／L 6-BA+3．0mg／LKT+0．1mg／LNAA+5．5g／I琼脂+50g／L蔗糖”；最佳蔗糖质量浓度为 50g／L；4个紫花苜蓿 品种愈伤组织诱导率的差异不大，但分化特性有较大差异，分化率 由高到低依次为北极星、阿尔刚金、皇后 2000和国 产紫花 。 【结论】不 同的种子预处理方法对 4种紫花苜蓿品种 的分化率均有一定影响，3种处理 中以4℃下浸泡 2h 处理的分化率最高，与其他处理间的差异达显著水平 (P0．05)。不 同激素组合是影响紫花苜蓿下胚轴愈伤组织诱 导率和分化率的主要原因，不同激素组合处理间的差异均达到显著水平 (P0．05)，2，4一D与 6-BA配合对紫花苜蓿 下胚轴愈伤组织的诱导效果较好 ，分化培养基 中高质量浓度 的NAA，不利于愈伤组织的分化 ；不 同基因型对分化率 有显著影响 (P0．05)，而不同蔗糖质量浓度对分化率的影响不显著 (P0．05)。说 明其对离体培养再生体系的影响 作用与处理方法 、培养基、基 因型相 比是次要 的。 [关键词] 紫花苜蓿；下胚轴 ；愈伤组织；离体再生体系 [中图分类号] $551 ．703．53 [文献标识码] A [文章编号] 1671—9387(2008)11-0029—06 Establishmentofthesystem ofhighfrequencyregeneration frOm hypocotylsofAlfalfa YANG Li—hui，CHEN Yao—feng ，HAN Qiao—ling ，LIChun—lian (口．CollegeofAnimalSciencesandTechnology。b．CollegeofAgronomy。NorthwestAFUniversity，Yangling，Shaanxi712100。China) Abstract：[ObjectivelThesystem ofhighfrequencyandstableregenerationwasestablishedfrom hy— pocotylsoffourkindsofAlfalfanamedNorthPoleStar，Algonquin，Empress2000andAlfalfaofChinain ordertoimprovesomecharactersbytransformingsomegenes．[MethodlTheresearchstudiedtheeffects ofpretreatments，mediums，genotypesand thequalityconcentrationofsucroseon thecharactersofhypo— cotyls．[ResultlTheresultsshowedthatlow temperaturepretreatmentsuchas4℃ couldimprovethe