马铃薯悬浮细胞原生质体培育及植株再生.pdfVIP

维普资讯 @ 一 吉林农业大学学报 2000，22(1)：52--55 journalof1ilinASri~w．dtura]University 马铃薯悬浮细胞原生质体培养及植株再生 艳秋 齐义杰 顾德峰 (吉林农业大学农学院 长春 130118) 摘 要：试罩}所培养的3十基 目型的马斡蓦悬浮细胞原生质俸妁菝得再生植棘 。童待蛆织鲑代培养基 、分化 培养基噩基 目型时分化撅率有显著影响 关-词：量兰 墨星塑照 墨圭蕉箜 再生 组辑话 ， 直书k再芏． 中阻分类号：$532．0353 文献标识码 ：A 文章一号：1000．5684(2000)01．0052-04 PlantRegenerationfrom theProtoplastsofSuspensionCellCultureofPotato QIXin zHAOYir堰-jun，WANGYan—qiu，QIYi-jieeta1． (CollegeofA~,ortota．y，JilinAgriculturalUniversity，C,hangchun130118) Abstract：Inthisexperiment，thepmotpl~tsofpotatowerefrom suspensionceU．Theregenera— tionplantsofthreepotatogenetypeshadbeenobtainedalteretdtured．Genetypeandkindof mdeium ateverycukurestageohvioug~effectedd~f[ernat[ationfrequency． KeyW ords：po tato；suspensioncell；protoplast；regneeration 马铃薯(~olanum 6∞ m L．)是世界重要 1 材料与方法 作物之一，它的品种改 良一般采用有性杂交和芽 变进行。由于它是多倍体 ，而且是营养繁殖 ，所以 1．1 材料 育种效率不高。1977年 Shepard和Totten首次 春薯一号、春薯 四号和春薯三号 ×克新二号 由马铃薯 叶肉细胞原生质体再生 出完整植株 的无菌苗叶片愈伤组织建立的悬浮细胞系。无菌 后 l，国内外陆续有很多报道L2一 。马铃薯原生 苗由吉林省蔬菜研究所赢赠。 质体培养并再生植株是进行遗传操作的重要基 1．2 方法 础，而且在原生质体的再生植株中．变异体出现的 1．2．1 悬浮细胞系的建立 通过茎尖培养建立 频率也比较高。进行马铃薯悬浮细胞原生质体培 试管苗，由叶片诱导出愈伤组织后进行悬浮培养， 养，首先要建立 良好的悬浮细胞系，对于马铃薯悬 具体方法参见文献[7]。 浮细胞培养方法，作者已经有详细的报道 J：在 122 原生质体分离 悬浮培养细胞根据继代 马铃薯悬浮细胞培养 的基础上 ，对其原生质体培 时间分组，将 1mL的悬浮细胞放入 10mL酶混 养进行了研究，以便进行原生质体的遗传转化工 合液中，酶液组成为：CAluhse(OnzukaR一10) 作。本研究对 3个基因型的马铃薯悬浮细胞原生 2．0％+Pectinase(Sigma)0_8％+CaCI22H2O 质体进