西洋参冠瘿组织培育条件对其人参皂苷rb1 含量的影响.pdfVIP

维普资讯 药 物 生 物 技 术 216 PharmaceuticalBiotechnology 2002，9(4)：216～219 西洋参冠瘿组织培养条件对其人参皂苷 Rb含量的影 响 于荣敏 ，宋永波 ，李 铣 ，张荫麟 (1．沈 阳药科大学 ，沈阳 110016；2．中国医学科学院药用植物研究所 ，北京 10O094) 摘 要 考察了不同理化 因子对西洋参冠瘿组织生长及其主要活性成分人参皂苷 (glnsenosides)Rb。的影 响 ，采用 HPLC法测定 了Rbl的含量。结果表明：在考察的6种培养基中，wl1ite培养基最适合人参皂苷 I 。的累 积 (0．755％)；培养25d时Rb 累积含量最高(0．732％)；接种量为6gFW／flask最有利于 Rb。合成 (0．618％)；培养 基 pH值在 5．6时 累积量最高 (0．692％)；肌醇的浓度为0．05g／L时，能明显促进 合成 (1．881％)。 关键词 西洋参 ；冠瘿组织培养；人参皂苷Rb；高压液相色谱 中图分类号：R915；$567．5 1 文献标识码 ：A 文章编号 ：1005—8915(2002)04—0216—04 西洋 参 (Panaxquinquefolium)又称 美 国人参 2 方法 (Americangenseng)，原产于美 国东部和加拿大 ，是 五加科 (Araliaceae)人参属植物，属名贵药材 J。西 2．1冠瘿组织培养 洋参生长期较长，且受病虫害 、气候 、环境及栽培技 2．1．1 冠瘿组织继代培养 冠瘿组织接种于装有 术多方面的限制，故产品远不能满足市场要求 ，且 40ml经 121oC、lbar、消毒20min固体培养基 的100 价格 昂贵 。本研究利用转基 因技术诱导成功西洋 ml三角瓶中。置于 25土1cc的恒温培养箱中暗培 参冠瘿组织，并对其生长条件进行了考察。西洋参 养，每 20d左右继代一次。 的主要活性成分为人参皂苷类 ，其中人参二醇型皂 2．1．2 固体培养冠瘿组织生长参数测定 以细胞 苷 Rb含量较高 ，且具抗氧化 、清除 自由基 、抑制中 干重为生长指标，所得结果为每一实验条件下 12 枢神经兴奋等药理作用 。本文报道西洋参冠瘿组 个样品的平均值。收获细胞置烘箱 内干燥 ( 织培养及其次生代谢产物人参皂苷 Rb。的HPLC 6occ)至恒重 ，称重 ，计算收获量。细胞生长量 =收 分析测定。 获量 一接种量 (g．DW／flask)；细胞产率 =每瓶细胞 干重 ×皂苷含量 (g．Dw／n￡Lsk)；相对生长量 =细胞 1 仪器与材料 生长量 ／接种量 (g．DW／g)。 HH·B11·500电热恒温培养箱 (上海跃进医疗 2．2 HPLC法测定冠瘿组织 中人参皂甙 Rb。含 吾 [2—4] 器械厂)；MT一152数显温控仪 (宁波 自动仪表研究 ^ 所)；CJTS00超 净工作 台 (沈 阳医疗器械 厂)； 2．2．1 色谱条件 色谱分析柱为 Di咖onsil C一 GB4027·1—83手提式压力蒸汽消毒器 (上海医用 18(2ooinln×4．6inln，5 )；流动相 ：乙腈 ：水 =30： 核子仪器厂)；PHS一25型酸度计 (上海雷磁仪器 70；流速 ：1．0ml／min；进样量 ：20 l；检测波长 ：203 厂)；西洋参