紫花苜蓿愈伤成苗高频再生系统的建立及其影ⅱ 向因子的研究.pdfVIP

维普资讯 中国农业科学 2002，35(12)：1579—1583 ScientiaA~riculturaSinica 紫花苜蓿愈伤成苗高频再生体系的建立 及其影 Ⅱ向因子的研究 张万军，王 涛 (中国农业大学国家农业生物技术重点实验室，北京 100094) 摘要 ：对秘鲁苜蓿等品种的子叶和下胚轴愈伤再生植株过程进行 了系统研 究。经筛选获得 了以改 良的SH大 量元素 +MS微量元素及铁 盐+水解酪蛋 白+VB19．9rng·L +VB69．5rng·LI1+尼克酸 4．5rng·L +琼脂 8g· LI1为基本成分 的愈伤成苗高频再生体系。其 中，诱导愈伤和保持 愈伤 的培 养基加 2．0mg·L-。2，4一D+0．025 mg·LI1KT；诱导再生植株分化的培养基加 0．4rng·LI1KT+20g·L 的蔗糖 ；诱导生根 的培养基为1／2MS，其 中 蔗糖浓度为 10g·L-。秘鲁苜蓿子叶愈伤组织分化率达 100％，下胚轴愈伤 组织分化率达 92％ 以上 。以该体系完 成苜蓿愈伤植株再生具有高效、快速 的特 点，完成植株再生仅需 60--70d。 关键词：紫花苜蓿；愈伤组织；植株再生 Constructionthe System ofHighFrequencyRegenerationfrOm CallusofAlfalfaandStudyonthe EffectFactors ZHANG Wan—jun．WANG Tao (ChinaAgriculturalUniversity，NationalAgrobiotechnologyLaboratory，BeOing100094) Abstract：A high frequency regeneration system ofMedicago sativa L． hasbeen developed from the cotylendandhypocotylbystudyingon theeffectfactorsabout2，4一D，KT，sucroseand thetypeofmedium ． Thesystem consistsofmodifiedSH macronutrients + MSmicronutrients + CH 2mg·L一 + agar8g·L一 + VBI9．9mg’L +VB69．5mg L‘ +Nicotinicacid4．5mg L‘一 ．Baseonthesystem ，add2，4一D 2mg·L～ ， KT 0．025mg’L一 andsucrose30g’L一 forthecallusinitiation andmaintainmedium．addKT 0，4mg-L一 andsucrose20g’L一 fOrthedifferentiatemedium．Therootingmedium consistsof1／2MS+10g-L～ SU— crose．Inthissystem，thedifferentiateratiofrom cotylendandhypocotylofPerualfalfais100％．92％ sepa— rately．Theperiodofregeneration isonly60—70days． Keywords：M edicagosativa L．；Callus；Plantregeneration 20世纪 70年代 以来，苜蓿组织培养和遗传转 KT、蔗糖浓度的调节 以子 叶为外植体对 22个苜蓿 化方面的研究工作一直未 间断。1972年 Saunders 品种 进行 了植株 再 生试 验，植株 再 生率 最 高为 等从苜蓿未成熟的花药、子房、子叶愈伤组织分化再 74％，并筛选出和 田苜蓿、保定苜蓿、武功苜蓿、拉达 生植株获得成功_1]，1981年上海植物生理所杨燮荣