骨组织工程基础研究与临床应用 回首与展望.pdf

2008 2 22 2 中国修复重建外科杂志 年 月第 卷第 期 129 · · • 述 评 • 骨组织工程基础研究与临床应用：回顾与展望 赵春华 【关键词】 骨组织工程 基础研究 临床应用 中图分类号： R318 Q813 文献标志码：C 组织工程学作为21 世纪生命科学领域的重大前 培养法和离心培养法，前者是将无菌抽取的骨髓加入 沿课题，至今仅20 余年的发展时间里，在种子细胞、生 培养液制成细胞悬液，原代培养物以造血细胞成分居 物材料、组织构建及临床初步应用等方面已取得颇多 多，为利于BMSCs 贴壁生长，可采用DMEM 和FBS 。 具有重大价值的成果。时至今日，组织工程研发的部 FBS 终浓度为10% ～20% ，塑料培养瓶较一般玻璃培 分产品已进入临床，更有产品已实现了规模化生产和 养瓶更有利于BMSCs 贴壁生长。有人主张用4% 醋 上市销售（如美国的组织工程皮肤和软骨产品），而经 酸溶解RBC ，去除RBC 对BMSCs 的贴壁干扰，但有人 典组织工程骨目前已进入了临床研究阶段，出现了一 认为RBC 会随着换液而逐渐去除，对BMSCs 影响不 [4] 系列可喜的研究成果。现结合国内外骨组织工程基础 大。细胞融合后以1 ∶2 比例传代，3 ～4 d 换液1 次 。 研究和临床应用作回顾与展望。 离心培养法是根据骨髓中细胞成分比重的不同，采用 离心分离法提取单核细胞进行培养。在新鲜无菌的骨 1 骨组织工程的研究现状 髓抽取物中加入抗凝培养液稀释，1 500 ～2000 r/ min 1.1 种子细胞 离心20 ～30 min ，采集交界处的单核细胞层，PBS 洗 种子细胞是组织工程研究中最基本的环节，其核 涤2 ～3 次后，加入培养液接种培养。机体BMSCs 数 心问题在于如何获取适合临床应用需要的种子细胞， 量很少，接种数目太少会影响成骨率，太多对于临床 6 2 热点问题在于新型种子细胞，如干细胞的应用、种子细 应用又不太现实，接种细胞 1×10 /cm 即能满足成骨 胞体外大规模扩增技术的应用。目前，BMSCs 已经成 要  求。 为种子细胞的最重要来源。我国科学家在种子细胞的 目前，三维细胞培养技术已在骨组织工程中得