铁皮石斛内生细菌的分离鉴定与酶活性分析.pdfVIP

浙江理工大学学报，第30卷，第6期，2013年11月 of Sci—Tech JoumalZhejiang University VoI．30，No．6，Nov．2013 文章编号：1673—3851(2013)06—0896一05 铁皮石斛内生细菌的分离鉴定与酶活性分析 俞婕，周小风，胡秀芳 (浙江理工大学生命科学学院，杭州310018) 摘要：从铁皮石斛组织中分离获得内生细菌52株，其中根部分离得到42株，茎部分离得到10株。编号为 群。对优势菌株进行鉴定及酶活性检测，结果表明，4株菌株分别鉴定为芽孢杆茵属未知种、苏云金芽孢杆茵、木糖 氧化无色杆菌和解淀粉芽孢杆菌，这些茵具有不同程度的蛋白酶、淀粉酶、卵磷脂酶和固氮酶活性。 关键词：铁皮石斛；内生细菌；分离；鉴定；酶活性 中图分类号：Q936 文献标志码：A 作用的内生细菌菌株，进一步为铁皮石斛的促生研 0 引 言 究奠定基础，从而推动铁皮石斛产业的发展。 铁皮石斛(DP以dr06i“moⅣ沥行以zP)是中国传 1 实验材料与方法 统名贵中药，具有滋阴清热、益胃生津、润肺明目、补 肾积精、及提高人体免疫力、防癌、抗衰老等诸多神 1．1实验材料 奇的治疗与保健功能[1]。然而，铁皮石斛自然资源 供试铁皮石斛样品采自浙江奉化种植基地。 濒临灭绝，人工种植已成为铁皮石斛植物原料的主 分离培养基：牛肉膏蛋白胨培养基(NA)(蛋白 5 O1000 胨10 g，琼脂15g，H2 要来源。因此，促进人工种植铁皮石斛的生长以及 g，牛肉膏3g，NaCl 7．4～7．6)。蛋白酶活性检测培养基采用 保持其药效成分成为铁皮石斛产业的重要课题。 mL，pH 脱脂牛奶培养基(脱脂奶粉15 铁皮石斛内生菌(包括内生真菌和内生细菌)在 g，琼脂15g，H。O 1000 其生长和发育过程中扮演重要角色。大量研究显 mL，pH7．o～7．2)；淀粉酶活性检测采用可 溶性淀粉培养基(可溶性淀粉10 示，内生真菌具有促进铁皮石斛种子萌发[2]，促进 g，(NH。)2S0。2．5 3 0．2 C、N、P等营养物质的吸收[3]，分泌植物生长激素[4]g，K2HP04g，MgS04·7H20g，FeS04· o．0255 o．13 等作用；内生细菌对宿主植物也有积极作用，主要包 7H20 g，蛋白胨5g，CaCl2 g，pH 5．5)；磷脂降解酶活性检测用卵磷脂培养基(胰蛋白 括固氮作用[5。6]、促进矿质元素吸收[7]、产生植物激 5 素[8]、分泌抗生素类物质抵御植物病原菌的侵害[9]胨10g，酵母膏3g，NaClg