抗胰蛋白酶真核表达载体的构建及其细胞内定位.pdfVIP

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, 4$% , !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!南方医科大学学报26!YGA_C!dW‘!3J;c0!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!$$’j’2.0 ! 抗胰蛋白酶真核表达载体的构建及其细胞内定位 / 刘承武!胡水旺!陈登宇!冯国开!邓 鹏!姜 勇 南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验 ) ! 室 广东广州 5/$5/5H 摘要!目的 构建鼠 抗胰蛋白酶 的真核表达载体观察其在 细胞中的表达及定位情况 方法 提取 ! )NN,H O*P.,. / 小鼠肝脏组织的总 通过 扩增得到 编码序列 然后将该编码序列克隆到带有血凝素 标 QNRQSB +ON +,T7+ NN, )PNH ’ 上 随后转染 细胞 在荧光显微镜下观察结果 结果 重组质粒经 酶切和测序鉴定 记的载体UBVON.PN O*P.,. T7+ 证明构建正确 转染实验发现%该质粒能够在O*P.,. 细胞中表达%表达产物主要定位在细胞质中 结论 成功构建带 标签的 真核表达载体 该载体能在哺乳动物细胞中有效表达并正确定位 为下一步深入研究 在细胞内 PN NN, % NN, 的相关生物学功能提供了一个重要工具 关键词! 抗胰蛋白酶!血凝素!细胞内定位!载体构建 ! / 中图分类号! 文献标识码! 文章编号! ( ) +.(.F / N /(-.454 ##’ #.#4#%#4 !#$%’(%)* + , -’.,/%)( -01-$$)* 2-3% + ,415,6,*%)%/1$)* ,*7 %5- 4(,4)8,%)* + %5- -01-$$)* 17’(% )* 9:; = (-44$ R*37CWJ?DAXP3YCA;D:J?X7P8OVWJ?KAXZ8O[[AG\:;XV8O[TWJ?X6*NO[]GJ? VWU:^_9WJ_ GMT:_CGUCKI;GG?K :J‘aWKR:bG^:_G^K GMT^G_WG9;BI GM [A:J?‘GJ?T^Gc;JBWX YGA_CW^JdW‘;B:3J;cW^I;_KX [A:J?eCGA 5/#5/5X7C;J:

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